想请教一下大家RNA提取问题
今天提了4个样品的RNA,用的是天根的多糖多酚试剂盒,用的是植物叶片,感觉纤维比较多,研磨成粉的时候好像就没有研磨那么细,肉眼可见还是有纤维的,想问一下大家需要要研磨的很细吗?还有粉末加入量以多少合适呢,用700微升的裂解液?不知道加完裂解液离心时间太短还是转速太低,上清液里还有好多细小粉末?可能我吸取上清液的时候枪头有碰碰侧壁的组织碎片,所以提取的RNA质量不太好,不知道是这个原因吗?
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今天提了4个样品的RNA,用的是天根的多糖多酚试剂盒,用的是植物叶片,感觉纤维比较多,研磨成粉的时候好像就没有研磨那么细,肉眼可见还是有纤维的,想问一下大家需要要研磨的很细吗?还有粉末加入量以多少合适呢,用700微升的裂解液?不知道加完裂解液离心时间太短还是转速太低,上清液里还有好多细小粉末?可能我吸取上清液的时候枪头有碰碰侧壁的组织碎片,所以提取的RNA质量不太好,不知道是这个原因吗?
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研的越细破碎细胞效果越好,固然提取得效果也越好。粉末大概100-300ul都可以,多了提取效果反而不好
研磨完放到EP管里就看出体积了
我用的也是天根的,提取棉花叶片RNA,上面写离心1min,我感觉时间太短了啊,不知道延长离心时间有没有影响
磨样的时候还是细一点儿比较好,并且试剂盒里的吸附柱有承受上限,不用加太多粉末,天根的RNA试剂盒优点在于提取的RNA很干净,但浓度倒不会很高,做个定量什么的肯定够了的,
我提叶片的时候有纤维都拿出来了,哈哈哈。离心用了5分钟