第一种方法：最开始做的是壳聚糖膜，将膜在京尼平和戊二醛溶液（1mmol/L）中50度处理5小时，蒸馏水清洗后取了20平方厘米，加入BSA溶液（1mg/ml），常温下轻微振摇12h，然后测上清液中的蛋白质含量，跟没有添加膜的蛋白质含量根本没有区别，用的考马斯亮蓝法。
可能原因：壳聚糖膜在京尼平和戊二醛溶液（1mmol/L）中50度处理5小时后，壳聚糖中的氨基会与京尼平发生反应，反应后膜变成蓝色，取出清洗后不再与BSA反应，所以上清液中BSA含量不变，

第二，将交联剂直接加到成膜溶液中成膜，做固定化，同样 的，上清液中蛋白质含量根本没有减少。
与第一种方法基本相同，还是京尼平已经跟壳聚糖发生反应了，不再与BSA反应。

第三，做了直径2mm的壳聚糖微球，用交联剂处理后同样接不上去酶，还是一样的原因。
建议：
试试将壳聚糖，京尼平，BSA同时加到一起，50度交联反应5小时左右，应该可以将BSA交联到壳聚糖分子上面。具体做法：按第二种方法，将交联剂京尼平与壳聚糖，BSA一起配成溶液，成膜，即可。

你好，想问你一下BSA考马斯亮蓝测定标曲的溶液是用水配还pbs溶液配？还有那个测吸光度时的对照溶液是考马斯亮蓝染色液吧？