大片段基因连接，转化问题
我想把一个6.5kb的片段倒入4.7kb的载体中，insert 是从一个质粒上切下来的，保证有相同的酶切位点，连接体系试过1:1，2:1, 3:1，热激，都不成功，已经做了快俩月了，求大神帮忙！
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怎么个不成功法？
是不长菌，还是都是假阳性？
试试电转？电转化效率不是一般的高。不成功是板上没长还是都长空载？
赡苊涣习桑颐谴笃巫龅氖焙蚰Χǘ纫话阌�5:1或者10:1，多得是片段，片段比较大的不太好粒�