LPS刺激RAW264.7细胞,诱导不出炎症模型,求大神解答下!!!
试过用100ng/ml,300ng/ml,1ug/ml刺激6h,12h,24h.均检测不到细胞培养液上清中IL-6,TNF-a,IL-1b因子变化,后来又降低了培养液中血清的浓度,也试着用我们学院其他实验室的RAW264.7细胞进行实验,均未检测出变化,哪位大神做出来过给指教下,不胜感激! 返回小木虫查看更多
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试过用100ng/ml,300ng/ml,1ug/ml刺激6h,12h,24h.均检测不到细胞培养液上清中IL-6,TNF-a,IL-1b因子变化,后来又降低了培养液中血清的浓度,也试着用我们学院其他实验室的RAW264.7细胞进行实验,均未检测出变化,哪位大神做出来过给指教下,不胜感激! 返回小木虫查看更多
IL-1b在上清是检不到的要收集细胞破碎才能收集到,TNF我用刺激4小时就可以检测到而且还要稀释10倍,你看看是不是你的lps不行了,换个试试
谢谢,那请问下你用的哪个公司的LPS?能提供下货号么 谢谢
sigma的挺贵的,建议自己提取lps,方法挺简单的,可以买个lps提取试剂盒就OK了。详情请点击http://www.bioconsumable.com/cn/ ... 447480300770271.htm
谢谢哦,你有做过LPS刺激巨噬细胞的实验么
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我LPS用的是100ng/ml。但是之前测NO结果很好,然后买了其他的试剂盒,但是不知道怎么搞的细胞好像有抗药性了一样,没有显著差异,连阳性药都没啥效果了……细胞边缘是有少量分化的,但之前也这样没什么影响,完全不知道该怎么办了,顺便求指教!!!
你好,我想问一下你最后这个lps刺激raw264.7细胞1μg/ml这个模型成功了么?我也遇到了一样的问题,如果成功了方便分享一下经验么?