D101大孔树脂上样、洗脱求助!!!
按照药典做党参的TLC,样品处理需要用到大孔树脂,但是小弟没做过大孔树脂,对加样和洗脱不是很清楚,有以下几点疑问,希望大侠们能指导下。。
1、加样时(柱子用乙醇、水已洗好),是把下面的阀门关闭加的吗?还是把阀门开的很小,慢慢加样?
2、我今天是把阀门开的很小加的样,但是把样品液加完了后,有颜色的样品液为什么不往下渗呢?(静置2-3小时了)
3、洗脱的时候先用水洗,那么问题来了,我今天做的时候用水洗,水洗的时候有颜色的样品液依然没有往下渗,当换到乙醇洗的时候,有颜色的样品液全部洗下来了,我觉得不太对,希望大家指导下!!! 返回小木虫查看更多
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正常现象,等你的TLC结果出来吧。
谢谢,明天跑完板子看下结果。
1.这个没太大区别,反正大孔树脂吸附的很杂(只是没吸附那些水溶性成分),不需要考虑色谱行为。可以考虑边加边流,等试液加完前端快到阀门的时候关闭,然后吸附会。
2.有颜色的是被大孔树脂吸附了吧。
3.水洗当然洗不下来咯(水洗的就是水溶性杂质),换醇就从大孔树脂解吸附了(这才是你要的成分,毕竟后面点样也是用醇液的)。
太感谢了
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1.加样时应该把下面的开关打开,这样你的树脂有一个很好的沉积,而且刚下来的不会是你的样品,只不过是你洗树脂的溶剂罢了。
2一般洗脱出来的都是无色或者淡色的,我以前实习时候做过不知道是不是普遍现象,树脂对他相似的物质是很容易吸附的.
你做的对,乙醇冲下来的的就是大孔树脂吸附的样品,水冲洗的时候就是把大孔树脂不吸附的除掉。