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外行请教免疫荧光染料问题

作者 zmm: 来源: 小木虫 150 3 举报帖子

想用荧光标记的抗体来检测细胞表面的抗原marker
发现有些抗体是两种荧光染料同时标记的
比如PE-Cy7 anti-mouse CD11b，PerCP-Cy5.5 anti-mouse B220
而有些就是一种荧光染料标记的
比如：AlexaFluor-488 anti-mouse CD3

想请教下，一种荧光标记和两种荧光标记的区别和目的各是什么呢？

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精华评论

sheepshowzz

同樣的激發光可以讓你看不同的螢光.
因為A、B染劑靠的夠近時, A被激發後所放出的放射光剛好被B給吸收, 讓B放射出更遠的放射光.

螢光染劑
http://cmurdc.cmu.edu.tw/HVIS/5- ... owcytometer/Dye.htm

還有, 現在單獨染劑的�?號分布相當寬?V, 容易產生光譜重疊(Spectral overlap)或是螢光溢散(Spillover), 就是說越多螢光參數需要被分辨時, 也就有越多螢光�?號間互相干擾的問題需要被解決.
這部分你有興趣的話可以去研究 ”光學補償”(Compensation)...
http://www2.cmu.edu.tw/~cmcrdc/e ... ass=A&id=18，
sheepshowzz

恩...我剛好像講得有點難懂...
其�?就是提供更多的選擇, 讓使用者可以挑選干擾較低的組合.
而我說的同樣的激發光可以讓你看不同的螢光..
就像是PE、PE-Cy5、PE-Cy7的激發光都是496nm.
但卻可以產生三種不同的放射光, 578、667、785nm.

http://www.bdbiosciences.com/tw/ ... sampledata/blue.jsp
zmm

引用回帖:
3楼: Originally posted by sheepshowzz at 2015-08-03 11:27:57
恩...我剛好像講得有點難懂...
其�?就是提供更多的選擇, 讓使用者可以挑選干擾較低的組合.
而我說的同樣的激發光可以讓你看不同的螢光..
就像是PE、PE-Cy5、PE-Cy7的激發光都是496nm.
但卻可以產生三種不同的放 ...

基本理解了，谢谢您的解答