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外行请教免疫荧光染料问题已有1人参与
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想用荧光标记的抗体来检测细胞表面的抗原marker 发现有些抗体是两种荧光染料同时标记的 比如PE-Cy7 anti-mouse CD11b，PerCP-Cy5.5 anti-mouse B220 而有些就是一种荧光染料标记的 比如：AlexaFluor-488 anti-mouse CD3 想请教下，一种荧光标记和两种荧光标记的区别和目的各是什么呢？ 谢谢！！ |
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sheepshowzz
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
zmm: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2015-08-03 11:40:08
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同樣的激發光可以讓你看不同的螢光. 因為A、B染劑靠的夠近時, A被激發後所放出的放射光剛好被B給吸收, 讓B放射出更遠的放射光. 螢光染劑 http://cmurdc.cmu.edu.tw/HVIS/5- ... owcytometer/Dye.htm 還有, 現在單獨染劑的�?號分布相當寬?V, 容易產生光譜重疊(Spectral overlap)或是螢光溢散(Spillover), 就是說越多螢光參數需要被分辨時, 也就有越多螢光�?號間互相干擾的問題需要被解決. 這部分你有興趣的話可以去研究 ”光學補償”(Compensation)... http://www2.cmu.edu.tw/~cmcrdc/e ... ass=A&id=18 |
2楼2015-08-03 11:07:05
sheepshowzz
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恩...我剛好像講得有點難懂... 其�?就是提供更多的選擇, 讓使用者可以挑選干擾較低的組合. 而我說的同樣的激發光可以讓你看不同的螢光.. 就像是PE、PE-Cy5、PE-Cy7的激發光都是496nm. 但卻可以產生三種不同的放射光, 578、667、785nm. http://www.bdbiosciences.com/tw/ ... sampledata/blue.jsp |
3楼2015-08-03 11:27:57
4楼2015-08-03 11:39:39
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