关于载体和pcr产物双酶切后的酶连问题
将载体质粒的多克隆位点（相距70bp左右）双酶切后，与同样进行过的双酶切产物进行酶连，它们之间量的比例如何？酶连效率怎样？我做了几次酶连后，转化大肠杆菌效果都不理想，一个转化子都没有长，不知道什么问题。请赐教！
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我们实验室倾向于 (质粒用量*目标基因的大小)/ 质粒的大小*3=目的基因用量，转化效率比较高。
你用的连接酶上有最佳比例，然后根据摩尔比算出体积比就OK了
目的片段：载体的分子数为3或4就可以了。一般载体用50ng，再根据载体和目的片段大小计算出目的片段的用粒�
一般酶连的话，条带比较清晰可以考虑用1：3或1：4 ，700bp很好连，祝你好运