【求助/交流】mRNA水平的差异分析---------关于RT-PCR
最近有个困惑我的问题,希望大家能我点意见。我做不同条件的mRNA水平的差异分析。涉及到RNA的提取问题:有两个问题:1.在RNA提取的时候,我选择的样品应该是单因素的样品还是经过正交设计后的样品,因为我的不同条件是很多个。
2.我在提取RNA的时候提不到,采用了裂解液,还有热酚法。都提取效果不好。我提取的是细菌。请给个建议吧。万分感谢 返回小木虫查看更多
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最近有个困惑我的问题,希望大家能我点意见。我做不同条件的mRNA水平的差异分析。涉及到RNA的提取问题:有两个问题:1.在RNA提取的时候,我选择的样品应该是单因素的样品还是经过正交设计后的样品,因为我的不同条件是很多个。
2.我在提取RNA的时候提不到,采用了裂解液,还有热酚法。都提取效果不好。我提取的是细菌。请给个建议吧。万分感谢 返回小木虫查看更多
提细菌RNA...Trizol法效果就很好啦,很容易的,只要注意一定要用新鲜的样本,并防止RNA降解(比如戴手套口罩,用RNA酶抑制剂等等)就可以了。
另外,做差异分析的话,应该是先做单因素,再做正交试验吧,反正都要做的...哈哈。
[ Last edited by holyala on 2011-3-23 at 11:05 ]
谢谢你的回答,我万分感谢。做差异分析提RNA,单因素和正交都得提RNA吗
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......这个主要得看你的实验设计了,不过~~好像提RNA都是必须的,不然怎么用RT-PCR来分析啊~
我现在就困惑在该提哪个的RNA?