24小时热门版块排行榜    

查看: 2519  |  回复: 47
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

胡程

银虫 (小有名气)

[求助] 分子克隆问题求助 已有9人参与

各位同仁:大家好,咨询一个问题。做分子克隆,载体与片段连接后(室温1小时)加入感受态dh5α,冰上30分钟,然后42热激1分钟,37℃,260转摇35分钟,然后离心涂板,过夜长成这个吊样,以前做的都长得挺好,只是这两天问题百出,求分析原因啊,必有重谢。ps:①为了排除涂板问题的干扰,一个是用磁珠涂布的,一个没有磁珠涂板
②为了排除质粒问题,做了一个其他质粒的control。③板子为amp抗性,和我一起做实验的一些人都能长得很好。跪求!!

分子克隆问题求助
C4639360E0FF7D032EFF9C65B19D48DB.jpg


分子克隆问题求助-1
DD6DB14F5CD252ECE0D12A74CF958234.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

做最好的自己
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

siriusxuan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
胡程: 金币+2, 有帮助, 谢谢,希望进一步交流分析。 2015-12-27 14:26:58
我就问你一句,AMP加了多少。
此座可言轻社稷,江山万里起风尘。
4楼2015-12-27 11:31:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 48 个回答

yilberg

新虫 (小有名气)

我是这样做的:冰上30min,42度90s,冰上5min,然后过夜,220rpm/min 37度 4小时。离心,涂板,没出现过你这种情况。dh5a 是用的takara

发自小木虫IOS客户端
2楼2015-12-27 09:30:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yilberg

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yilberg at 2015-12-27 09:30:56
我是这样做的:冰上30min,42度90s,冰上5min,然后过夜,220rpm/min 37度 4小时。离心,涂板,没出现过你这种情况。dh5a 是用的takara

过夜是连接的时候。转化不过夜的。打错了

发自小木虫IOS客户端
3楼2015-12-27 09:32:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

科学小覃

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
胡程: 金币+2, 有帮助, 期待您的进一步分析,以前做的从来没出现过这种情况,也是醉了 2015-12-27 14:29:46
照片看不清楚,能描述一下具体问题吗?
生物科学
5楼2015-12-27 12:38:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 72/3600 2026-08-16 13:15 by 医学老男孩
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见