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shuiyue2728

新虫 (正式写手)

[求助] 【求助/交流】分子克隆 双tag

我的目的基因连接在pCS2+-C-flag 上,目前想做一个双tag,HA,myc,His 都可以
方法有二:可以直接设计含有tag的引物扩增 再导载体
          也可以直接设计含有flag的引物把现有的扩增下来 连到有其他tag的载体上。目前遇到的问题是貌似查不到这些tag精确的序列 在ncbi上找了些有tag的载体 发现同一个tag序列又不一样 比如HA 在这两个载体里就不一样http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/FJ905207.1
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/AF531171.1

现在想求助分子克隆这方面的高手 想知道怎么查找这些tag的序列
其次上述方法只是个人计划 如有更专业的建议将不甚感激
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xiangshengyan

木虫 (正式写手)

ANNA&KEVIN
2楼2011-12-08 00:24:34
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shuiyue2728

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiangshengyan at 2011-12-08 00:24:34:
有很多vector 都有HAtag 照抄就是了 google 出来一大堆
例如
http://www.yrbio.com/bioresource ... or/1055/pcmv-ha.pdf
[url]http://www.sunrisesci ...

那不同载体中HA的序列怎么又不一样呢
你发的 和我找的都有这个情况


3楼2011-12-08 10:55:41
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zhaoyonggang

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

shuiyue2728(金币+10): 2011-12-09 09:43:47
你可以看一看不同序列是否是简并序列,编码的是同一氨基酸序列。可能用于不同表达系统的载体上的tag编码序列是经过种属优化的。
4楼2011-12-08 12:48:38
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