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lilongping新虫 (正式写手)
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长片段克隆用invitrogen公司试剂盒问题求助 已有3人参与
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最近用PCR扩增得到6.5k左右条带，想做做长片段PCR克隆，用Invitrogen公司的TOPO® XL PCR Cloning试剂盒做了一次克隆：按照这个试剂盒操作说明，片段4ul 连接1ul 载体，25℃，30min后，转化到TOP 10 感受态，在卡拉霉素抗性平板上过夜培养后，生长了大概有200左右的克隆，我挑取24个之后用M13F-M13R引物做菌落PCR,但是，检测的结果非常奇怪：有很多条带，大家看看这个是什么原因，哪里出问题了啊？ 我连接的PCR片段是条带单一的，浓度为26ng/ul。 图片最中间的是全式金15k的DNA分子量Marker  2014-08-17 长片段克隆检测G,H;.jpg |
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