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潇湘、西瓜匠

新虫 (初入文坛)

[求助] 我pcr之后跑胶的条带模糊不清,但是能看出有条带,Marker也一样的? 已有5人参与

如题,大家看下我的胶图,帮忙分析下原因。

我pcr之后跑胶的条带模糊不清,但是能看出有条带,Marker也一样的?


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木有西瓜的冬天~~~
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371522029

金虫 (正式写手)

小鱼儿

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
那么小片段,需要总小的marker不要用原来嗯嗯大的。胶片浓度加大,2%的胶片试试。

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6楼2015-12-10 10:05:21
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樊雪1994

金虫 (小有名气)

2楼2015-12-10 00:12:11
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lifechuteng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
Marker也跑成这样说明不仅是扩增产物的问题,而是电泳过程出问题了。
比如是否恒压或恒流?
电泳胶是否配制正确?
胶染还是泡染?如果泡染,是否时间太长?

PS:这样跑电泳有点浪费……
3楼2015-12-10 09:02:41
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371522029

金虫 (正式写手)

小鱼儿

你這個pcr基本上是引物二聚体的感觉。我估计更电泳缓冲液体有关。最好是新的,胶片也要用缓冲液配置。另外上样也要特别的细心。电泳电压不要太大或者太小,注意恒压。

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4楼2015-12-10 09:09:19
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