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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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潇湘、西瓜匠

新虫 (初入文坛)

[求助] 我pcr之后跑胶的条带模糊不清,但是能看出有条带,Marker也一样的? 已有5人参与

如题,大家看下我的胶图,帮忙分析下原因。

我pcr之后跑胶的条带模糊不清,但是能看出有条带,Marker也一样的?


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木有西瓜的冬天~~~
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371522029

金虫 (正式写手)

小鱼儿

你這個pcr基本上是引物二聚体的感觉。我估计更电泳缓冲液体有关。最好是新的,胶片也要用缓冲液配置。另外上样也要特别的细心。电泳电压不要太大或者太小,注意恒压。

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4楼2015-12-10 09:09:19
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樊雪1994

金虫 (小有名气)

2楼2015-12-10 00:12:11
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lifechuteng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
Marker也跑成这样说明不仅是扩增产物的问题,而是电泳过程出问题了。
比如是否恒压或恒流?
电泳胶是否配制正确?
胶染还是泡染?如果泡染,是否时间太长?

PS:这样跑电泳有点浪费……
3楼2015-12-10 09:02:41
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潇湘、西瓜匠

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 371522029 at 2015-12-10 09:09:19
你這個pcr基本上是引物二聚体的感觉。我估计更电泳缓冲液体有关。最好是新的,胶片也要用缓冲液配置。另外上样也要特别的细心。电泳电压不要太大或者太小,注意恒压。
...

我要的条带是114和91大小的,这个图片是先经过pcr,然后用了一种特异酶切,然后跑出来的,应该在100marker上下,然后就是最小面的条带不知道哪里来的,是引物二聚体?

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木有西瓜的冬天~~~
5楼2015-12-10 10:00:19
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