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aibpmj

新虫 (初入文坛)

[求助] RT-PCR 做出来之后除了marker 其他的都没有条带是怎么回事??? 已有3人参与

刚入门做pcr,我做的是h5禽流感的RT-PCR,如图,第一孔是marker,第二孔是阳性对照,第三孔是阴性对照,其余为待检样品,怎么最后跑完胶的结果是这样子的,求大神指导

RT-PCR 做出来之后除了marker  其他的都没有条带是怎么回事???
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随风而去
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高gaoeryang

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

没有扩增出目的产物,重新设计引物进行扩增
2楼2015-09-16 13:44:44
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baleful

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

是不是陪胶加的染料加少了,我之前EB加的少,marker看的清楚但是没有条带,重配胶之后就没问题
3楼2015-09-17 15:10:47
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wuzilin2008

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

Marker有条带说明胶和染料没问题,可能是配体系漏加或错加了成分,酶,引物,模板任何一个出错都没条带。还有反应程序问题,若是一步法RT-PCR,看看是否加了那个反转录的过程(一般45度30分钟具体看试剂盒说明)。

发自小木虫Android客户端
4楼2015-09-17 15:56:42
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