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aibpmj

新虫 (初入文坛)

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性别: GG
专业: 基础兽医学

[求助] RT-PCR 做出来之后除了marker 其他的都没有条带是怎么回事？？？已有3人参与

刚入门做pcr，我做的是h5禽流感的RT-PCR,如图，第一孔是marker，第二孔是阳性对照，第三孔是阴性对照，其余为待检样品，怎么最后跑完胶的结果是这样子的，求大神指导

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随风而去

1楼 2015-07-22 09:50:30

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高gaoeryang

银虫 (小有名气)

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专业: 生物化学

【答案】应助回帖

没有扩增出目的产物，重新设计引物进行扩增

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2楼2015-09-16 13:44:44

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baleful

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【答案】应助回帖

是不是陪胶加的染料加少了，我之前EB加的少，marker看的清楚但是没有条带，重配胶之后就没问题

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3楼2015-09-17 15:10:47

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wuzilin2008

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在线: 3.2小时
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专业: 病毒学

【答案】应助回帖

Marker有条带说明胶和染料没问题，可能是配体系漏加或错加了成分，酶，引物，模板任何一个出错都没条带。还有反应程序问题，若是一步法RT-PCR，看看是否加了那个反转录的过程（一般45度30分钟具体看试剂盒说明）。

发自小木虫Android客户端

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4楼2015-09-17 15:56:42

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