| 查看: 561 | 回复: 2 | ||
shuangzi8761银虫 (著名写手)
|
[求助]
毛壳纤维素酶基因RT-PCR无带
|
|
小弟要从RNA水平反转录到cDNA，然后扩增纤维素酶基因全长，因为这个毛壳属菌的基因组几经公布了，直接设计引物做PCR扩全长即可。但是每次做完RT-PCR，电泳检测均没有目的带，求教各位，是何问题，该如何解决?? 附RNA电泳图，和RT-PCR电泳图。 （用的CMC诱导培养基培养菌，培养2-3天，RNA没问题，之前RT-PCR做了45-60度的退火梯度均无带，所有的试剂都是新换的，反转录用了TAKARA和transgen的盒子均无带，引物用DNA做模版能扩出来，说明引物和退火温度没有问题）  RNA 选的第一条 浓度在1800ug/ml 260/280=2.06  前两条为cDNA模版，后一条为DNA模版，试剂和反应条件均一样，2k的maker,目的带800左右 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有214人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
gaowei706
铁杆木虫 (职业作家)
资深潜水者
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 7006.8
- 散金: 50
- 红花: 4
- 帖子: 4915
- 在线: 384.3小时
- 虫号: 579089
- 注册: 2008-07-04
- 性别: GG
- 专业: 作物种质资源与遗传育种学
2楼2012-09-05 17:17:07
shuangzi8761
银虫 (著名写手)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 6472.4
- 散金: 798
- 红花: 8
- 帖子: 1549
- 在线: 309.3小时
- 虫号: 1449451
- 注册: 2011-10-18
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
3楼2012-09-05 20:33:40
