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RT-PCR成本及难易程度
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小虫是学药理的 准备入手RT-PCR（实验室没人做过） 各种仪器包括PCR仪什么的都有现成 1请问除了仪器之外 各种试剂贵不 这个实验的成本高不？ 2还有 我想做药物对肿瘤细胞某些基因表达水平的检测 请问该用一步法还是两步法？ 这个实验比起western blot 难易程度如何？ 谢谢 就怕钱花了但没做出来 |
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2楼2011-10-03 09:05:59
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【答案】应助回帖
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西瓜(金币+3): 欢迎交流！确实比western好做很多，RNA提好了，后面就没啥大问题了。其实有real-time PCR仪也分一步法和两步法的哈，一步法就是反转录和PCR都在同一管。 2011-10-04 00:24:12
gigiloveu(金币+5): 非常感谢 2011-10-04 09:41:44
西瓜(金币+3): 欢迎交流！确实比western好做很多，RNA提好了，后面就没啥大问题了。其实有real-time PCR仪也分一步法和两步法的哈，一步法就是反转录和PCR都在同一管。 2011-10-04 00:24:12
gigiloveu(金币+5): 非常感谢 2011-10-04 09:41:44
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各种仪器包括PCR仪什么的都有现成 1请问除了仪器之外 各种试剂贵不 这个实验的成本高不？ 分子实验的药品还是贵的，不过5万以内足够了（要是不熟练、不顺利就另计）。 2还有 我想做药物对肿瘤细胞某些基因表达水平的检测 请问该用一步法还是两步法？ 如果有Real-time PCR仪还是用两步法，结果重现性好。一步法真没做过。如果没有Real-time PCR仪就是按照普通的PCR做法，只要内参基因表达一致即可。这个实验比起western blot容易多了，就是跑PCR而已，而且一定有结果。 |
3楼2011-10-03 11:34:10
