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gigiloveu

铜虫 (小有名气)

[求助] RT-PCR成本及难易程度

小虫是学药理的 准备入手RT-PCR(实验室没人做过)

各种仪器包括PCR仪什么的都有现成
1请问除了仪器之外 各种试剂贵不  这个实验的成本高不?

2还有 我想做药物对肿瘤细胞某些基因表达水平的检测 请问该用一步法还是两步法?

这个实验比起western blot 难易程度如何?  谢谢 就怕钱花了但没做出来
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助! 2011-10-03 11:00:04
个人觉得不是特别难,我也是新手,摸索个两三个月就差不多了,
各种试剂是挺贵的,做分子的哪有不烧钱的呀
风雪夜归人
2楼2011-10-03 09:05:59
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poog502

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 欢迎交流!确实比western好做很多,RNA提好了,后面就没啥大问题了。其实有real-time PCR仪也分一步法和两步法的哈,一步法就是反转录和PCR都在同一管。 2011-10-04 00:24:12
gigiloveu(金币+5): 非常感谢 2011-10-04 09:41:44
各种仪器包括PCR仪什么的都有现成
1请问除了仪器之外 各种试剂贵不  这个实验的成本高不?
分子实验的药品还是贵的,不过5万以内足够了(要是不熟练、不顺利就另计)。
2还有 我想做药物对肿瘤细胞某些基因表达水平的检测 请问该用一步法还是两步法?
如果有Real-time PCR仪还是用两步法,结果重现性好。一步法真没做过。如果没有Real-time PCR仪就是按照普通的PCR做法,只要内参基因表达一致即可。这个实验比起western blot容易多了,就是跑PCR而已,而且一定有结果。
3楼2011-10-03 11:34:10
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