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载体质粒的双酶切 已有3人参与
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我做的是Pcu19质粒的双酶切，酶切体系如下：质粒10μL，10×H Buffer 4μL，ddH2O2 22μL ，SaL I 2μL，EcoRI 2μL。另一管质粒的量为20微升恩，其中水的量变为12微升，其他的不变。 然后将其放入37度恒温培养箱培养3h，再在80摄氏度使酶失活，最后进行电泳检测。图片如下：从下往上看一次点的是：Marker，对照空载体，酶切之后的两个产物。 为什么酶切之后的条带比空载体的条带大呢？？我试过好多个体系，但没有一个酶切成功，请各位虫友帮帮忙！  发自小木虫Android客户端 |
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可是酶切之后的质粒载体比没有酶切过的质粒载体还要大没道理啊，应该是环状的比线状的大吧。还有我的目的片段是850bp的，载体是大于2000bp的，如果连接上了应该不会只比酶切的大一点点吧？ 发自小木虫Android客户端 |
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2楼2015-11-29 17:01:02
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