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质粒的测序引物 已有3人参与
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本人刚刚接触接触分子不久，会的东西不多，还请各位赐教， 最近用psiCHECK-2插入一段目标片段（890bp）构建了一个质粒，准备送去测序，但发现还是有很多不太了解的地方， 1. 我在很多地方查了通用引物表，但是没有查到psiCHECK-2的通用引物，那么哪里能查到质粒的这种相关信息啊？ 2. 若是不用通用引物，自行在多克隆位点上下游设计测序引物去测我的插入片段，需要特别注意些什么？大家一般都是如何设计的？ 非常感谢各位！ |
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3楼2015-09-25 09:10:53
dorecnu
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【答案】应助回帖
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天下骡子一家: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢，用了oligo设计的引物，已经送去测序了 2015-09-26 14:43:46
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http://www.biofeng.com/zaiti/buru/psiCHECK-2.html 质粒信息可以从上面的页面中获得，初步看了一下图谱这个质粒应该没有通用引物。鉴于以上链接已经给出了载体序列，所以可以使用primer primer 6 软件设计引物，由于不知道你的基因克隆到什么位置，如果是notI,pmeI,xhoI,sgfI的话，闲来无聊帮你设计了一对：F：CAACTACAACGCCTACCTT(position:1407) R: AACCCTAACCACCGCTTA(position1792) 扩增片段长386bp。 |
2楼2015-09-24 20:22:44
4楼2015-09-25 09:35:30
dorecnu
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5楼2015-09-28 09:18:51
