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miao1991

新虫 (初入文坛)

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[求助] 求助pkd4 pkd20 pkd46这些质粒怎么测序呢

求助pkd4 pkd20 pkd46这些质粒怎么测序呢？想用一个统一的引物要自己合成了

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1楼 2014-06-02 23:06:05

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prthefu

木虫 (著名写手)

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楼主你好，我最近也在做敲除，用到pKD46质粒。但是我买来pKD46甘油菌后，划线、挑单克隆、提质粒，然后就是测序验证。
但是，我一直卡在了质粒测序验证这一步。我多次提取，测序引物为自己设计，选的质粒上前后两段，
单独菌落pcr已经验证过可以扩出条带，但是把质粒和引物送公司测序后就一直测序失败。
给的理由是引物结合不上或是质粒不纯等。
所以想请教楼主，能否指点一下，质粒验证这一步，我还要怎么做呢。真的没招了，在这上面也已经耽误好长时间了。

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nothing is impossible in this world，if you have the will to win，you can achieve anything

2楼2019-09-23 08:58:22

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