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miao1991

新虫 (初入文坛)


[求助] 求助pkd4 pkd20 pkd46这些质粒怎么测序呢

求助pkd4 pkd20 pkd46这些质粒怎么测序呢? 想用一个统一的引物  要自己合成了
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prthefu

木虫 (著名写手)

楼主你好,我最近也在做敲除,用到pKD46质粒。但是我买来pKD46甘油菌后,划线、挑单克隆、提质粒,然后就是测序验证。
但是,我一直卡在了质粒测序验证这一步。我多次提取,测序引物为自己设计,选的质粒上前后两段,
单独菌落pcr已经验证过可以扩出条带,但是把质粒和引物送公司测序后就一直测序失败。
给的理由是引物结合不上或是质粒不纯等。
所以想请教楼主,能否指点一下,质粒验证这一步,我还要怎么做呢。真的没招了,在这上面也已经耽误好长时间了。
nothing is impossible in this world,if you have the will to win,you can achieve anything
2楼2019-09-23 08:58:22
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