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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 蓝白斑筛选问题
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小鼹鼠

木虫 (小有名气)

[求助] 蓝白斑筛选问题 已有5人参与

请教一下，什么情况下需要用蓝白斑进行筛选，是载体容易自连的情况下吗？那么载体容易自连是因为是平端的吗？如果是粘性末端就不需要了？谢谢。

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天道酬勤
1楼 2015-08-31 19:13:35
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我只能说，蓝白斑筛选是一件很多余的事，抗生素筛就足够了

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2015-08-31 19:28:31
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沉默的独角兽

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
T 载体时间长了建议蓝白斑。
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3楼2015-08-31 20:23:14
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liuchbing

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

主要是根据你的克隆的片段的容易程度，如果片段较短，就比较容易成功，如果太长，建议使用蓝白斑，提高成功率
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每天进步一点点
4楼2015-09-23 14:15:39
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lchxs465

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
5楼2015-09-23 15:19:55
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MAYINGTAI

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 沉默的独角兽 at 2015-08-31 20:23:14
T 载体时间长了建议蓝白斑。

为什么？谢谢！
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6楼2015-09-23 15:25:33
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lchxs465 at 2015-09-23 15:19:55
我遇到过载体自连的情况，首先我的片段比较长，而且我的载体可能质量也不是特别好，所以我进行单克隆送测后发现有大量的载体自连（最严重的时候送测15个，14个都是自连）。所以如果你的片段比较长的话还是建议蓝白筛 ...

您好，请问你是用蓝白斑筛选之后，挑选白斑的再进行单克隆的挑取，然后测序的吗？测序结果是显示自连吗？谢谢，。因为我的样品也刚刚送去测序。
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7楼2015-09-23 15:51:24
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lchxs465

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
8楼2015-09-24 13:24:02
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by lchxs465 at 2015-09-24 13:24:02
我没有蓝白斑筛选，直接挑克隆送测的～送测结过就是空载，和我的片段序列比不上。。所以你可以蓝白筛选试试看

好的，谢谢！
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9楼2015-09-24 13:45:21
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沉默的独角兽

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by MAYINGTAI at 2015-09-23 15:25:33
为什么？谢谢！...

我遇到的是，T载体时间长了容易自连。
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10楼2015-09-24 16:27:33
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