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ayiyaya

金虫 (小有名气)

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[求助] 双抗夹心ELISA，怎么鉴定酶标抗体？

有一对配对抗体，把其中一个做了HRP标记，现在想确定HRP标记抗体的最佳工作浓度，但是目前还不知道最佳的包被抗体浓度，也不知道抗原要用多少浓度···
求指教，要如何下手？？？？？

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1楼 2015-07-09 14:18:51

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新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

8楼: Originally posted by ayiyaya at 2015-08-17 16:07:13
我后来用PBST+BSA，37度封闭一个半小时，基本上解决了这个问题，你可以尝试一下不同的封闭条件。你的酶标抗体鉴定过没？本底怎么样？也有可能是酶标抗体标记问题。引起这种现象的原因很多，想办法验证，找到问题所 ...

你好，想问一下，你加这两样的比例是多少啊？我的酶标抗体用抗原鉴定了，也测定了它所用的稀释比例，本地挺低的，但是配对检测的时候，会出现明显的显色，今天做了对比，的确是不加抗原也能反应，哎，很无语，非常感谢你提供帮助，之前查的说有加Tween的，这两天尝试一下