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【资料】《protocol book》《实验程序手册》（中文版、英文版）abcam公司资料
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Abcam的在线实验方案很受欢迎，因此Abcam制作了印刷版本便于实验室使用，它覆盖了最常用的实验室应用，包括： 荧光 蛋白质印迹 免疫组织化学 流式细胞术 ELISA 免疫沉淀反应 ChIP 缓冲液 母液 该书专为任何需要这些技术的已测试实验方案的实验人员设计。该书还包括抗体选择信息和保存指南。 目录 欢迎来到 Abcam 关于 Abcam .......................................................................... 1 Abcam 帐户的好处 ............................................................... 2 Abreviews® and Abpoints® ................................................... 2 技术资料 第一章：抗体和抗体的结构 .................................................. 3 第二章：抗体纯化 ................................................................ 6 第三章：抗体选择和稀释 ..................................................... 7 第四章：荧光 ....................................................................... 9 4.1 荧光染色-工作原理 ........................................................ 9 4.2 荧光染料表 ................................................................... 11 第五章：蛋白质免疫印迹技术 ............................................ 13 5.1 样品准备 ...................................................................... 15 抽提缓冲液 ................................................................... 15 蛋白酶和磷酸酶抑制剂 ................................................. 16 细胞培养物的裂解准备 ................................................. 16 组织抽提准备 ............................................................... 16 蛋白质含量的测定 ........................................................ 17 凝胶上样准备 ............................................................... 17 5.2 电泳 .............................................................................. 18 PAGE 凝胶准备 ............................................................ 18 阳性对照 ....................................................................... 19 分子量 markers ............................................................ 19 上样和跑胶 ................................................................... 19 使用对照 ....................................................................... 20 5.3 蛋白质的转移和染色 .................................................... 20 蛋白在凝胶中的显色 ..................................................... 20 转移 .............................................................................. 20 蛋白在膜上的显色：丽春红 .......................................... 22 膜封闭 .......................................................................... 22 加一抗孵育 ................................................................... 22 加二抗孵育 ................................................................... 22 显色 .............................................................................. 23 5.4 参考文献 ...................................................................... 23 5.5 常见问题的解决方法 .................................................... 24 第六章：免疫组织化学和免疫细胞化学 .............................. 27 6.1 IHC-石蜡技术说明 (IHC-P) ........................................... 27 6.1.1 优化 IHC-P 抗体 .................................................. 29 6.1.2 脱蜡 ..................................................................... 29 6.1.3 抗原修复 .............................................................. 30 6.1.4 免疫组织化学染色 ............................................... 33 6.1.5 文献 ..................................................................... 37 6.2 免疫组织化学冷冻切片切割技术 (IHC-Fr) .................... 37 6.3 免疫细胞化学 (ICC) ...................................................... 37 6.4 IHC/ICC的固定和通透 .................................................. 38 6.5 灌注固定法 ................................................................... 40 6.6 鼠对鼠染色法 ............................................................... 41 6.7 疑难解答 IHC/ICC ........................................................ 42 第七章：ELISA .................................................................. 44 7.1 间接 ELISA .................................................................. 44 7.2 直接 ELISA .................................................................. 46 7.3 双抗夹心 ELISA ........................................................... 48 7.4 疑难解答-ELISA ........................................................... 50 第八章：流式细胞术 ........................................................... 53 8.1 流式细胞术/FACS 的推荐对照 ..................................... 55 8.2 直接染色步骤 ............................................................... 56 8.3 间接染色步骤 ............................................................... 57 8.4 细胞内染色 ................................................................... 58 8.5 流式细胞术常见问题分析 ............................................. 61 第九章：免疫沉淀 (IP) ....................................................... 63 9.1 裂解缓冲液 ................................................................... 63 9.2 抗体到珠的交联 ............................................................ 67 9.3 用 IgM 抗体进行免疫沉淀 ............................................ 68 9.4 免疫沉淀常见问题分析 ................................................. 69 第十章：染色质免疫沉淀 ................................................... 71 10.1 交联染色质免疫沉淀 (X-ChIP) .................................. 71 10.2 ChIP 常见问题分析 .................................................... 76 第十一章：缓冲液和储备溶液 ............................................ 77 11.1 PBS, 三乙醇胺缓冲液和三乙醇胺- 吐温缓冲液的配制 ....................................................... 77 11.2 免疫印迹 ..................................................................... 77 11.3 免疫组化 (IHC) ........................................................... 79 11.4 酶联免疫吸附试验 ...................................................... 80 11.5 流式细胞术 ................................................................. 80 11.6 免疫沉淀 ..................................................................... 80 11.7 染色质免疫沉淀 .......................................................... 80 第十二章：抗体保存指南 ................................................... 82 技术支持 Abcam 公司在线资源 ......................................................... 84 产品信息指南.................................................................84 在线实验设计 ..................................................................... 85 在线实验设计海报 .............................................................. 85[ Last edited by silicare on 2012-10-18 at 17:48 ] |
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