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[求助]
ELISA同一样品，稀释倍数越高，得到结果越大？为嘛？
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ELISA检测血清样品中蛋白含量。常规过程。 同一样品不同稀释倍数得到结果差别较大，并且是随着稀释倍数越大越大，根据标准曲线计算出的结果就越大，这是什么个情况？ PS：之前也有碰到过，以为是稀释时混合不够均匀的问题，后一段时间没做，这次的结果又出现在这个问题。之前做倍比稀释，这次是3倍稀释。 Sample ID Loc Dilution Blank Data Calc Conc SMP02 A4 20 0.386 3378.65 B4 60 0.32 7141.63 C4 180 0.194 10934.7 D4 540 0.108 17991.7 [Ave] 0.252 9861.67 百思不得其解啊。。谁能给些意见建议，先在此谢过啦~  |
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2楼2012-06-21 11:36:58
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5楼2012-06-21 23:37:04
6楼2012-06-21 23:40:01
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初涉这个领域，很多东西都不太了解。还请多多赐教。先在此谢过~ 1、关于理论血药浓度与我的稀释倍数： 实验采用ICR小鼠，给药剂量为5mg蛋白/kg体重，药液体积为100ul/20g体重，皮内注射。于注射后0.5h、1h、2h、4h、6h、24h等取血。不知该如何计算理论血药浓度，是根据小鼠全血量和皮内注射这种给药方式的生物利用度吗？ 我的稀释倍数是参考之前做其他蛋白皮内给药时的经验稀释倍数。但第一次做的时候，稀释倍数过大（从100X、200X开始做倍比），做8个倍比稀释只有1~2个倍数在标准曲线范围内甚至会全部梯度超限。因此后续实验调整了稀释倍数，从20X开始做倍比。 2、抗药性抗体： 小鼠都只给过一次药物。在48h采血时，已经能产生抗体了吗？ 为什么产生抗药性抗体后，ELISA检测时，稀释倍数大，值就越高呢？ 我该如何检测是不是产生了抗药性抗体呢？ 3、HOOK效应： 先百度学习了下此效应。。此效应是说明标准曲线的浓度梯度设计不合理吗？标准品的浓度偏高了？ 这个ELISA方法是从别人手中接过来直接重复的，只知操作，思考不足。。 |
8楼2012-06-24 14:01:25
9楼2012-06-24 14:29:30
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