应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » ELISA同一样品，稀释倍数越高，得到结果越大？为嘛？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
172/2返回列表上一页12
查看: 5991  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

liushan09

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by liushan09 at 2012-06-24 14:01:25
初涉这个领域，很多东西都不太了解。还请多多赐教。先在此谢过~
1、关于理论血药浓度与我的稀释倍数：
实验采用ICR小鼠，给药剂量为5mg蛋白/kg体重，药液体积为100ul/20g体重，皮内注射。于注射后0.5h、1h、2h、 ...

1、标准品浓度稍做调整之后标准曲线见附图，之前从500ng/ml开始，现在的是从300ng/ml开始。标准曲线只是出现了S曲线的上半段，是不是意味着可以在将标准品浓度降低，尽量延长其线性区间？（现在的直线范围可视为0.03-0.1，或者0.03-0.13.）
2、样品的结果，见附图
选择OD值落在0.03-0.13之间的数据。这样结果可信么？
赞一下 回复此楼
11楼2012-06-24 15:01:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

merryhan

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by liushan09 at 2012-06-24 15:00:50
1、标准品浓度稍做调整之后标准曲线见附图，之前从500ng/ml开始，现在的是从300ng/ml开始。标准曲线只是出现了S曲线的上半段，是不是意味着可以在将标准品浓度降低，尽量延长其线性区间？（现在的直线范围可视为0. ...

1.你将标曲图纵坐标用线性，横坐标用log，这样得到的图是S形曲线。
2.你的标曲的OD值范围和定量范围分别是多少？看你的标曲图感觉准确度挺低的，应该测得的点基本都在标线上。
赞一下 回复此楼
12楼2012-06-26 13:39:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

merryhan

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by liushan09 at 2012-06-24 14:01:25
初涉这个领域，很多东西都不太了解。还请多多赐教。先在此谢过~
1、关于理论血药浓度与我的稀释倍数：
实验采用ICR小鼠，给药剂量为5mg蛋白/kg体重，药液体积为100ul/20g体重，皮内注射。于注射后0.5h、1h、2h、 ...

1.小鼠的理论血药浓度为：5mg/kg:58.5ml/kg再乘以F（生物利用度），58.5ml/kg是小鼠的血容量，得到0.08547×Fmg/ml就是小鼠体内的血药浓度。
2.你的实验一共就采集到48h，应该没有抗药性抗体产生。
3.HOOK效应你可以验证一下，方法：做10×ULOQ，100×ULOQ，1000×ULOQ,测定这几个浓度的OD值，如果随着浓度增大而OD降低就表明有HOOK效应。（ULOQ就是你的最高定量限）
赞一下 回复此楼
13楼2012-06-26 13:45:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liushan09

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by merryhan at 2012-06-26 13:39:05
1.你将标曲图纵坐标用线性，横坐标用log，这样得到的图是S形曲线。
2.你的标曲的OD值范围和定量范围分别是多少？看你的标曲图感觉准确度挺低的，应该测得的点基本都在标线上。...

昨天将标准品浓度范围扩大，做了标准曲线，横坐标用log，纵坐标用线性。
浓度设置、OD以及标准曲线如下：
1、常规S曲线是指以横坐标浓度用log，纵坐标OD用线性吗？我看我们这边软件上设置的相反的，横标准用的线性，纵坐标log了。哪种方式是对的呢？
2、做出来S曲线的线性范围可以视作300~18.75吗？
赞一下 回复此楼
14楼2012-06-28 08:21:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liushan09

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by merryhan at 2012-06-26 13:39:05
1.你将标曲图纵坐标用线性，横坐标用log，这样得到的图是S形曲线。
2.你的标曲的OD值范围和定量范围分别是多少？看你的标曲图感觉准确度挺低的，应该测得的点基本都在标线上。...

另将之前的数据采用横log纵线性处理了下，也是类似线性的关系。
但是，样品不同稀释倍数间数值存在差别这个问题还是存在。可能是稀释倍数的影响，或者是样品中血清的影响。
我现在做的消除血清干扰的方法：在标准品的稀释的过程中引入血清作为内标，比如20X稀释（这个稀释倍数尽量与样品的第一个稀释倍数相同），10STD+10血清+180稀释液，目的在于采用血清替换标准品溶液环境。后续稀释与标准品相同，采用倍比稀释。作为内标。结果处理：根据标准曲线拟合出的方程和内标的OD，给出内标的计算值。用计算值除以实值，得出一个系数。
赞一下 回复此楼
15楼2012-06-28 08:33:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liushan09

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by liushan09 at 2012-06-28 08:33:01
另将之前的数据采用横log纵线性处理了下，也是类似线性的关系。
但是，样品不同稀释倍数间数值存在差别这个问题还是存在。可能是稀释倍数的影响，或者是样品中血清的影响。
我现在做的消除血清干扰的方法：在标准 ...

刚才没打完，错点了回复。。
样品的计算值除以这个系数，作为最后的结果。
但是，内标不同稀释倍数间也是有差别的。如果标准曲线可靠的话，这是不是血清的影响呢？血清的影响该如何消除呢？
附图：内标与同板标准曲线（横log纵线性重新处理）。这个是之前的结果。
赞一下 回复此楼
16楼2012-06-28 08:39:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

trif

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你的试剂盒是用的夹心法，还是竞争法啊？竞争法的话这种情况很正常啊！
赞一下 回复此楼
大鬼
17楼2013-03-13 14:53:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liushan09 的主题更新
172/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 334分机械专硕求调剂 +3 蛋花紫菜汤 2026-04-03 3/150 2026-04-07 14:49 by 逍遥cocoa
[硕博家园] 0856材料化工求调剂，一志愿211，初试成绩349 +4 江淮北月 2026-04-05 4/200 2026-04-06 22:44 by chenzhimin
[考研] 269电子信息求调剂，可转专业 +5 独酌wl 2026-04-06 5/250 2026-04-06 17:23 by 土木硕士招生
[考研] 0703化学调剂325分 +12 15771691647 2026-04-04 13/650 2026-04-06 12:00 by lijunpoly
[考研] 材料与化工371求调剂 +14 陪琳看海 2026-04-04 15/750 2026-04-06 06:59 by houyaoxu
[考研] 295求调剂 +8 FZAC123 2026-04-03 8/400 2026-04-05 17:46 by 蓝云思雨
[考研] 电子信息调剂交叉学科有推荐吗 +6 jhtfeybgj 2026-04-01 9/450 2026-04-05 11:13 by 猪会飞
[考研] 320求调剂 +3 一样圆 2026-04-04 3/150 2026-04-04 22:29 by 啵啵啵0119
[考研] 342求调剂 +3 Liang7111 2026-04-04 5/250 2026-04-04 19:47 by dongzh2009
[考研] [调剂信息]085408光电信息 求调剂 总分291分数一英一 +3 iz11az 2026-04-02 3/150 2026-04-04 19:09 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿0817化学工程与技术，求调剂 +24 我不是只因 2026-04-02 28/1400 2026-04-04 15:15 by dongzh2009
[考研] 22408求调剂 354分 可跨专业 +3 hannnnnnn 2026-04-04 3/150 2026-04-04 14:35 by 土木硕士招生
[考研] 一志愿东北大学085901土木专硕345求调剂 +3 zxt11111 2026-04-04 3/150 2026-04-04 14:21 by 土木硕士招生
[考研] 085701求调剂 +7 龚禹铭 2026-04-04 8/400 2026-04-04 13:49 by 小小树2024
[考研] 考研调剂 +4 zybz冲冲冲 2026-04-03 6/300 2026-04-04 13:08 by zybz冲冲冲
[考研] 336求调剂 +8 kiyy 2026-04-01 8/400 2026-04-03 19:41 by lijunpoly
[考研] 293求调剂 +5 末未mm 2026-04-02 6/300 2026-04-03 15:20 by 王保杰33
[考研] 274求调剂 +9 顺理成张 2026-04-03 10/500 2026-04-03 15:10 by 啊俊！
[考研] 346求调剂 +5 郑诚乐 2026-04-02 5/250 2026-04-02 16:38 by SZW_UJN
[考研] 379求调剂 +3 ?苦瓜不苦 2026-04-01 3/150 2026-04-01 20:09 by 暮云清寒
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭