| 查看: 1577 | 回复: 4 | ||
蓝默儿金虫 (小有名气)
|
[求助]
夹心ELISA几种包被液尝试出现的问题已有3人参与
|
|
本人做双抗夹心ELISA：（酶标单抗自己标记，验证效价也比较高） 尝试过用辛酸-硫酸铵纯化多抗（小鼠血清）包被，酶标单抗作为检测抗体，但阴性，空白值比较高， 2.用三种未处理过的单抗腹水混合，包被，酶标单抗作为检测抗体，但阴性，空白值也比较高， 3.用辛酸-硫酸铵纯化一株单抗包被，酶标单抗作为检测抗体，但阴性，空白值比较高，阳性/阴性=2 分析：可能是自己的蛋白比较特殊，我的蛋白为炎性应激蛋白，考虑在制备多抗和腹水都是对小鼠的一种刺激，导致在血液及体液中此种蛋白会升高，刺激越强烈，血液及体液中此种蛋白越高。 后改后杂交瘤细胞上清包被，酶标单抗作为检测抗体，值是阳性=1.0，阴性=0.5，但还是很高，为什么会出现这中问题，杂交瘤细胞上清应该只用抗体，没有炎性蛋白了吧，值还是很高. 注：本人的包被做梯度稀释了，封闭液也尝试：脱脂乳，BSA，明胶。显色液也换了2种。都没有多大改观。  |
回复此楼» 猜你喜欢
寻求一种能扛住强氧化性腐蚀性的容器密封件
已经有7人回复
-
到新单位后，换了新的研究方向，没有团队，持续积累2区以上论文，能申请到面上吗
已经有8人回复
-
申请2026年博士
已经有6人回复
-
请问哪里可以有青B申请的本子可以借鉴一下。
已经有5人回复
-
天津工业大学郑柳春团队欢迎化学化工、高分子化学或有机合成方向的博士生和硕士生加入
已经有5人回复
-
2025冷门绝学什么时候出结果
已经有7人回复
-
请问有评职称，把科研教学业绩算分排序的高校吗
已经有6人回复
-
Bioresource Technology期刊，第一次返修的时候被退回好几次了
已经有7人回复
-
请问下大家为什么这个铃木偶联几乎不反应呢
已经有5人回复
-
康复大学泰山学者周祺惠团队招收博士研究生
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
求《安全血液和血液制品》原本或相关题库
已经有4人回复- 【分享】ELISA法测定单克隆抗体的效价
已经有7人回复
panda73
金虫 (小有名气)
- 应助: 80 (初中生)
- 金币: 1201.3
- 散金: 44
- 红花: 2
- 帖子: 191
- 在线: 42.5小时
- 虫号: 985964
- 注册: 2010-03-30
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2014-06-21 20:46:58
蓝默儿
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1281.8
- 散金: 19
- 帖子: 80
- 在线: 88.4小时
- 虫号: 1695664
- 注册: 2012-03-16
- 性别: MM
- 专业: 兽医传染病学
3楼2014-06-22 10:22:22
biotech_zhou
木虫 (著名写手)
待人以诚：专业/专注/专心
- 应助: 373 (硕士)
- 金币: 2037.6
- 散金: 206
- 红花: 6
- 帖子: 1441
- 在线: 317.6小时
- 虫号: 3078402
- 注册: 2014-03-21
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
4楼2014-06-25 12:04:20
swlsangon
木虫 (小有名气)
快乐的木虫
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 1555.4
- 红花: 2
- 帖子: 148
- 在线: 160.2小时
- 虫号: 3179064
- 注册: 2014-05-04
- 性别: GG
- 专业: 抗体工程学
5楼2015-03-13 16:36:49