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一叶烟萝

新虫 (小有名气)

[求助] 跑梯度不出峰 已有2人参与

做液质,样品是苯丙氨酸,浓度1mmol/l,流动相乙腈,跑梯度想看看乙腈在比例为多少时苯丙氨酸会出峰,一开始做的10%到40%,流速0.35,柱子是250mm,4.6微米的,C18的,根据公式推得梯度时间为1小时左右,后来又跑了40%到70%的,可是都不出峰,为什么啊。。。
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supercat0821

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
流速很低啊,柱子又不短。你把流速调大一点,有机相比例开始也可以调大一点,走下全波长扫描。
2楼2015-06-29 09:54:42
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

柱子不合适。这就跟拿制备柱做分析是一样的。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
3楼2015-06-29 11:32:15
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一叶烟萝

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by archbishop at 2015-06-29 11:32:15
柱子不合适。这就跟拿制备柱做分析是一样的。

什么样的柱子合适呢
4楼2015-06-29 18:11:55
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一叶烟萝

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by supercat0821 at 2015-06-29 09:54:42
流速很低啊,柱子又不短。你把流速调大一点,有机相比例开始也可以调大一点,走下全波长扫描。

质谱流速都挺低,不能调大。有机相70%也不出峰 啊
5楼2015-06-29 18:12:48
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

引用回帖:
4楼: Originally posted by 一叶烟萝 at 2015-06-29 18:11:55
什么样的柱子合适呢...

细一点的,短一点的。内径2.1毫米,柱长小于15厘米,如果你用的是HPLC,买粒径3.5微米的,或者球壳填料的,如果是UPLC就买UPLC专用的柱子。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
6楼2015-06-29 22:10:37
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supercat0821

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 一叶烟萝 at 2015-06-29 18:12:48
质谱流速都挺低,不能调大。有机相70%也不出峰 啊...

换柱子,苯丙氨酸属于非极性的,可以尝试换短的。
7楼2015-06-29 22:33:57
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zhishiyinwei

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我想问下楼主梯度时间是用什么公式计算出来的呢

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2015-07-03 12:35:40
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一叶烟萝

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by supercat0821 at 2015-06-29 22:33:57
换柱子,苯丙氨酸属于非极性的,可以尝试换短的。...

如果是极性氨基酸呢
9楼2015-07-04 15:41:00
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