应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 裂解液提蛋白
51/1返回列表
查看: 3565  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

mtyx

银虫 (小有名气)

[求助] 裂解液提蛋白 已有4人参与

我用裂解液提蛋白，离心后，说是取上清液，可是我离心后，不分层也没有沉淀，我想问一下是什么原因啊
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白表达纯化与检测

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-06-27 10:45:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

504775490

金虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
mtyx: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-06-27 21:22:09
楼主提的样品是什么，细胞还是组织，如果是细胞的话，放入裂解液后将细胞团吹散，冰上裂解30min，12000rpm，4度离心15min取上清即可，如果是组织的话要先将组织样本冰上磨碎，可以匀浆，也可以液氮研磨，之后加裂解液冰上裂解30min，之后的步骤是一样的。裂解液中记得加入蛋白酶抑制剂，冰上裂解中间可以混匀几次。祝好~~
赞一下 回复此楼
3楼2015-06-27 17:59:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

sageyaya

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你提的是什么蛋白呢？细胞还是组织？多少量对应了多少裂解液呢？是不是加的太少了，没有完全裂解呢。
赞一下 回复此楼
2楼2015-06-27 16:39:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mtyx

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 504775490 at 2015-06-27 17:59:43
楼主提的样品是什么，细胞还是组织，如果是细胞的话，放入裂解液后将细胞团吹散，冰上裂解30min，12000rpm，4度离心15min取上清即可，如果是组织的话要先将组织样本冰上磨碎，可以匀浆，也可以液氮研磨，之后加裂解 ...

是细胞，12孔板，每孔加入100ul的裂解液
赞一下 回复此楼
4楼2015-06-29 11:02:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

曼舞流苏

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
mtyx: 金币+1, ★有帮助 2015-06-30 08:47:12
引用回帖:
4楼: Originally posted by mtyx at 2015-06-29 11:02:26
是细胞，12孔板，每孔加入100ul的裂解液...

哇，我提蛋白用六孔板都嫌小，你居然用12孔板，还每孔100ul裂解液，估计蛋白浓度超低，建议6cm皿或者10cm皿养细胞。
赞一下 回复此楼
5楼2015-06-29 14:40:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭