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jozsh新虫 (小有名气)
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[求助]
菜鸟求助，我们在提取蛋白的时候有变性裂解液和非变性裂解液，他们有什么区别
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| 我们在提取蛋白的时候有变性裂解液和非变性裂解液，他们有什么区别，以前一直没有注意。到底什么情况用变性，什么情况不用变性的！！！！！困惑啊困惑！！！！！！ |
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 分子生化实验经验积累 | 质粒构建 |
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【答案】应助回帖
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| 不知道你指的是不是裂解细胞所用的裂解液，非变性的裂解液一般用的是弱的阴离子去污剂，像NP-40或Tween-20等，这些分子一般不会导致蛋白质变性，因此使得蛋白特别是膜蛋白保持天然状态。而变性的裂解液一般是加SDS，还有另外一些强的变性剂，它们能够使得蛋白完全变性，至于普通的western一般都是用的SDS，免疫组化情况较为复杂，你可以选择Triton-100或Tween-20，也可以用Saponin，很少听所用SDS的。完全的变性一般是有机溶剂去脂 |
5楼2013-03-15 09:43:09