24小时热门版块排行榜    

查看: 3677  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

mtyx

银虫 (小有名气)

[求助] 裂解液提蛋白 已有4人参与

我用裂解液提蛋白,离心后,说是取上清液,可是我离心后,不分层也没有沉淀,我想问一下是什么原因啊
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白表达纯化与检测

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

曼舞流苏

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
mtyx: 金币+1, 有帮助 2015-06-30 08:47:12
引用回帖:
4楼: Originally posted by mtyx at 2015-06-29 11:02:26
是细胞,12孔板,每孔加入100ul的裂解液...

哇,我提蛋白用六孔板都嫌小,你居然用12孔板,还每孔100ul裂解液,估计蛋白浓度超低,建议6cm皿或者10cm皿养细胞。
5楼2015-06-29 14:40:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

sageyaya

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你提的是什么蛋白呢?细胞还是组织?多少量对应了多少裂解液呢?是不是加的太少了,没有完全裂解呢。
2楼2015-06-27 16:39:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

504775490

金虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
mtyx: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-06-27 21:22:09
楼主提的样品是什么,细胞还是组织,如果是细胞的话,放入裂解液后将细胞团吹散,冰上裂解30min,12000rpm,4度离心15min取上清即可,如果是组织的话要先将组织样本冰上磨碎,可以匀浆,也可以液氮研磨,之后加裂解液冰上裂解30min,之后的步骤是一样的。裂解液中记得加入蛋白酶抑制剂,冰上裂解中间可以混匀几次。祝好~~
3楼2015-06-27 17:59:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mtyx

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 504775490 at 2015-06-27 17:59:43
楼主提的样品是什么,细胞还是组织,如果是细胞的话,放入裂解液后将细胞团吹散,冰上裂解30min,12000rpm,4度离心15min取上清即可,如果是组织的话要先将组织样本冰上磨碎,可以匀浆,也可以液氮研磨,之后加裂解 ...

是细胞,12孔板,每孔加入100ul的裂解液
4楼2015-06-29 11:02:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 07化学280分求调剂 +7 722865 2026-03-23 7/350 2026-03-25 09:29 by aa331100
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 0854 考研调剂 招生了!AI 方向 +5 pk3725069 2026-03-19 17/850 2026-03-24 17:30 by zhouxuan..
[考博] 26申博自荐 +3 whh869393 2026-03-24 3/150 2026-03-24 09:55 by 21018060
[考研] 求材料,环境专业调剂 +3 18567500178 2026-03-18 3/150 2026-03-23 23:50 by 热情沙漠
[考研] 336求调剂 +4 收到VS 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:02 by macy2011
[考研] 316求调剂 +7 梁茜雯 2026-03-19 7/350 2026-03-23 16:21 by lingjue
[考研] 一志愿070300浙大化学358分,求调剂! +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 一志愿华中农业071010,总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[基金申请] 学校已经提交到NSFC,还能修改吗? 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 一志愿西南交大,求调剂 +5 材化逐梦人 2026-03-18 5/250 2026-03-21 00:26 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
信息提示
请填处理意见