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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)

[求助] 关于Ripa裂解液 已有1人参与

小弟想自己配置Ripa裂解液,于是查了Ripa裂解液的配方,发现要加TritonX-100, SDS, NP-40,但这些东西具小弟所知都是起到破坏脂质双分子层的作用,小弟配制Ripa裂解液时只加其中一种可以吗?

另外小弟发现,为防止蛋白被分解裂解细胞前要加PMSF,抑肽酶Aprotinin,抑亮肽酶Leupetin,他们的作用有什么不同吗,我只用其中一种可以起到防止蛋白分解的作用吗?

最后一个问题是,有人说Ripa裂解液裂解的细胞,不能用考马斯亮蓝法测蛋白含量,这个是真的吗?为什么?

希望各位有经验的大神帮帮小弟,小弟在这里先谢谢各位大神了!!!
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
拉风蜗牛王: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-03-13 17:23:24
可以单用0.5 - 1% Triton-X100、NP-40、SDS。SDS裂解能力最强,但使蛋白质变性。
PMSF遇水分解,用前加;其它抑制剂可以提前加,也可以用前加。多用几种效果好。
2楼2014-03-13 16:37:29
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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-03-13 16:37:29
可以单用0.5 - 1% Triton-X100、NP-40、SDS。SDS裂解能力最强,但使蛋白质变性。
PMSF遇水分解,用前加;其它抑制剂可以提前加,也可以用前加。多用几种效果好。

您的意思是我只有Triton-X100、NP-40、SDS也可以使细胞裂解对吗?
3楼2014-03-13 17:23:55
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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-03-13 16:37:29
可以单用0.5 - 1% Triton-X100、NP-40、SDS。SDS裂解能力最强,但使蛋白质变性。
PMSF遇水分解,用前加;其它抑制剂可以提前加,也可以用前加。多用几种效果好。

前面打错了,您的意思是我只用Triton-X100、NP-40、SDS中的一种也可以使细胞裂解对吗?
4楼2014-03-13 18:07:50
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 拉风蜗牛王 at 2014-03-13 18:07:50
前面打错了,您的意思是我只用Triton-X100、NP-40、SDS中的一种也可以使细胞裂解对吗?...

一种就行了,一般不用SDS。
5楼2014-03-14 09:55:41
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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-03-14 09:55:41
一种就行了,一般不用SDS。...

好的!!!
6楼2014-03-14 22:47:47
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