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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 关于Ripa裂解液
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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)

[求助] 关于Ripa裂解液 已有1人参与

小弟想自己配置Ripa裂解液，于是查了Ripa裂解液的配方，发现要加TritonX-100, SDS, NP-40，但这些东西具小弟所知都是起到破坏脂质双分子层的作用，小弟配制Ripa裂解液时只加其中一种可以吗？

另外小弟发现，为防止蛋白被分解裂解细胞前要加PMSF，抑肽酶Aprotinin，抑亮肽酶Leupetin，他们的作用有什么不同吗，我只用其中一种可以起到防止蛋白分解的作用吗？

最后一个问题是，有人说Ripa裂解液裂解的细胞，不能用考马斯亮蓝法测蛋白含量，这个是真的吗？为什么？

希望各位有经验的大神帮帮小弟，小弟在这里先谢谢各位大神了！！！
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1楼 2014-03-11 18:30:16
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
拉风蜗牛王: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-03-13 17:23:24
可以单用0.5 - 1% Triton-X100、NP-40、SDS。SDS裂解能力最强，但使蛋白质变性。
PMSF遇水分解，用前加；其它抑制剂可以提前加，也可以用前加。多用几种效果好。
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2楼2014-03-13 16:37:29
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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-03-13 16:37:29
可以单用0.5 - 1% Triton-X100、NP-40、SDS。SDS裂解能力最强，但使蛋白质变性。
PMSF遇水分解，用前加；其它抑制剂可以提前加，也可以用前加。多用几种效果好。

您的意思是我只有Triton-X100、NP-40、SDS也可以使细胞裂解对吗？
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3楼2014-03-13 17:23:55
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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-03-13 16:37:29
可以单用0.5 - 1% Triton-X100、NP-40、SDS。SDS裂解能力最强，但使蛋白质变性。
PMSF遇水分解，用前加；其它抑制剂可以提前加，也可以用前加。多用几种效果好。

前面打错了，您的意思是我只用Triton-X100、NP-40、SDS中的一种也可以使细胞裂解对吗？
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4楼2014-03-13 18:07:50
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 拉风蜗牛王 at 2014-03-13 18:07:50
前面打错了，您的意思是我只用Triton-X100、NP-40、SDS中的一种也可以使细胞裂解对吗？...

一种就行了，一般不用SDS。
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5楼2014-03-14 09:55:41
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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-03-14 09:55:41
一种就行了，一般不用SDS。...

好的！！！
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6楼2014-03-14 22:47:47
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