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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取DNA时用的TE裂解液和TE缓冲液的区别？
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poren

新虫 (小有名气)

[求助] 提取DNA时用的TE裂解液和TE缓冲液的区别？

本人刚接手做DNA的测定，细胞破碎用的是TE裂解液，DNA提出来之后用的是TE缓冲液，这两种溶液成分相同，但是Tris和EDTA的浓度不同，请问原理是什么？哪位前辈不吝赐教，万分感激！
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1楼 2013-08-17 09:05:16
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龙虎山客栈

金虫 (文坛精英)

中国逗比股份有限公司逗比科

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
小妹，生物还是俺高中那点知识，回头我帮你问问我们学校学生物的几个同学哈

[ 发自小木虫客户端 ]
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如是青松未出栏，雏枝焉可惧霜寒。今朝只消低头看，他日参天仰面难。
2楼2013-08-17 09:32:05
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poren

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 龙虎山客栈 at 2013-08-17 09:32:05
小妹，生物还是俺高中那点知识，回头我帮你问问我们学校学生物的几个同学哈

多谢师兄啦，师兄辛苦了。
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3楼2013-08-17 09:37:53
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
poren(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-17 12:32:25
tris是作为缓冲体系pH的，EDTA可以螯合金属离子，抑制酶的活性。作为裂解液，为了保证裂解体系的pH并抑制核酸酶，Tris和EDTA的浓度需要稍微高一些。溶解DNA的TE主要是让DNA溶解在缓冲液里，因为样品相对干净，浓度会比较低。而且EDTA浓度高了会抑制后续实验中很多酶的反应。
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4楼2013-08-17 09:51:33
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poren

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-17 09:51:33
tris是作为缓冲体系pH的，EDTA可以螯合金属离子，抑制酶的活性。作为裂解液，为了保证裂解体系的pH并抑制核酸酶，Tris和EDTA的浓度需要稍微高一些。溶解DNA的TE主要是让DNA溶解在缓冲液里，因为样品相对干净，浓度会 ...

DNA已经提取出来了，还会有其他酶的存在吗？
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5楼2013-08-17 09:57:07
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anyaxiong

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by poren at 2013-08-17 09:57:07
DNA已经提取出来了，还会有其他酶的存在吗？...

4楼的意思应该是你提纯出来的DNA是不含酶的，但是Tris和EDTA浓度相对较低，主要是避免对后续试验的干扰，比如线性化（酶切）
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爱拼才会赢
6楼2013-08-17 10:06:44
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poren

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by anyaxiong at 2013-08-17 10:06:44
4楼的意思应该是你提纯出来的DNA是不含酶的，但是Tris和EDTA浓度相对较低，主要是避免对后续试验的干扰，比如线性化（酶切）...

谢谢解释，知道了。
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7楼2013-08-17 10:15:50
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by poren at 2013-08-17 09:57:07
DNA已经提取出来了，还会有其他酶的存在吗？...

纯化后的DNA当然不含酶，EDTA的作用不是抑制酶活性，所以浓度就比较低。因为有些DNA的生理功能需要结合一些金属离子，如Zn2+等，低浓度EDTA有助于稳定其结构。
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8楼2013-08-18 01:11:20
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poren

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-18 01:11:20
纯化后的DNA当然不含酶，EDTA的作用不是抑制酶活性，所以浓度就比较低。因为有些DNA的生理功能需要结合一些金属离子，如Zn2+等，低浓度EDTA有助于稳定其结构。...

谢谢解释。
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9楼2013-08-18 08:22:21
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poren

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-18 01:11:20
纯化后的DNA当然不含酶，EDTA的作用不是抑制酶活性，所以浓度就比较低。因为有些DNA的生理功能需要结合一些金属离子，如Zn2+等，低浓度EDTA有助于稳定其结构。...

请问您做DNA损伤测定不？
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10楼2013-08-18 08:28:44
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