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球球爱跳

铁虫 (小有名气)

[求助] SDS裂解液 配制

我配制提取DNA的SDS溶液时，加入的SDS后一直不溶解，65度加热 和加入浓盐酸都不好使，是因为要单独配制吗 ？
SDS缓冲液包括：Tris-cl  氯化钠 EDTA
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1楼 2012-10-09 17:23:29
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710002191

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
球球爱跳: 金币+4, ★有帮助 2012-10-09 21:04:22
1．1M Tris 溶液的配置

取Tris242.2g，加ddH2O至1600ml，加热溶解。
2．1M Tris－HCL Ph=8.0溶液的配置  

取 1M Tris 溶液160ml用分析纯盐酸调至Ph=8.0（需浓盐酸约8.5ml），加ddH2O定容至200ml，高压灭菌备用。
3. 0.5M EDTA溶液的配置

称EDTA－Na2 37.2g 先用140ml ddH2O溶解，加入14ml NaOH（10M）使EDTA－Na2溶解，再用NaOH（10M）溶液调至Ph=8.0，加ddH2O定容至200ml，高压灭菌备用。
4. 细胞裂解液的配制

称15gCTAB（Hexadecyltrimethylammonium bromide）（先用约600ml ddH2O加热溶解）放入烧杯中，加入75ml 1M Tris－HCL（Ph=8.0），58.5g NaCL（先用少量ddH2O溶解），30ml 0.5M EDTA，定容至1000ml，混合均匀备用。
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may
2楼2012-10-09 18:52:15
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ilyzp

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
球球爱跳: 金币+4, ★有帮助 2012-10-09 21:04:15
先把tris-HCl和EDTA配成PH8.0的溶液，然后再一起加进去，加入SDS之后，65度加热，应该能溶，我们都是这么溶的
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3楼2012-10-09 19:31:52
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球球爱跳

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ilyzp at 2012-10-09 19:31:52
先把tris-HCl和EDTA配成PH8.0的溶液，然后再一起加进去，加入SDS之后，65度加热，应该能溶，我们都是这么溶的

谢谢你 我加热久会试试，不是很澄清是不是加入氯化钠的事啊
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4楼2012-10-09 21:03:27
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球球爱跳

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ilyzp at 2012-10-09 19:31:52
先把tris-HCl和EDTA配成PH8.0的溶液，然后再一起加进去，加入SDS之后，65度加热，应该能溶，我们都是这么溶的

我配制后的溶液是有点粘稠 这样可以吗？
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5楼2012-10-09 22:08:48
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ilyzp

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 球球爱跳 at 2012-10-09 22:08:48
我配制后的溶液是有点粘稠 这样可以吗？...

可以的，我们的也这样，只要是澄清的就可以用
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6楼2012-10-11 23:10:47
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ilyzp

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 球球爱跳 at 2012-10-09 21:03:27
谢谢你 我加热久会试试，不是很澄清是不是加入氯化钠的事啊...

同时加NACL应该是没影响的
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7楼2012-10-11 23:12:25
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