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球球爱跳

铁虫 (小有名气)

[求助] SDS裂解液 配制

我配制提取DNA的SDS溶液时,加入的SDS后一直不溶解,65度加热 和加入浓盐酸都不好使,是因为要单独配制吗 ?
SDS缓冲液包括:Tris-cl  氯化钠 EDTA
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710002191

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
球球爱跳: 金币+4, 有帮助 2012-10-09 21:04:22
1.1M Tris 溶液的配置

取Tris242.2g,加ddH2O至1600ml,加热溶解。
2.1M Tris-HCL Ph=8.0溶液的配置  

取 1M Tris 溶液160ml用分析纯盐酸调至Ph=8.0(需浓盐酸约8.5ml),加ddH2O定容至200ml,高压灭菌备用。
3. 0.5M EDTA溶液的配置

称EDTA-Na2 37.2g 先用140ml ddH2O溶解,加入14ml NaOH(10M)使EDTA-Na2溶解,再用NaOH(10M)溶液调至Ph=8.0,加ddH2O定容至200ml,高压灭菌备用。
4. 细胞裂解液的配制

称15gCTAB(Hexadecyltrimethylammonium bromide)(先用约600ml ddH2O加热溶解)放入烧杯中,加入75ml 1M Tris-HCL(Ph=8.0),58.5g NaCL(先用少量ddH2O溶解),30ml 0.5M EDTA,定容至1000ml,混合均匀备用。
may
2楼2012-10-09 18:52:15
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ilyzp

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
球球爱跳: 金币+4, 有帮助 2012-10-09 21:04:15
先把tris-HCl和EDTA配成PH8.0的溶液,然后再一起加进去,加入SDS之后,65度加热,应该能溶,我们都是这么溶的
3楼2012-10-09 19:31:52
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球球爱跳

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ilyzp at 2012-10-09 19:31:52
先把tris-HCl和EDTA配成PH8.0的溶液,然后再一起加进去,加入SDS之后,65度加热,应该能溶,我们都是这么溶的

谢谢你 我加热久会试试,不是很澄清是不是加入氯化钠的事啊
4楼2012-10-09 21:03:27
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球球爱跳

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ilyzp at 2012-10-09 19:31:52
先把tris-HCl和EDTA配成PH8.0的溶液,然后再一起加进去,加入SDS之后,65度加热,应该能溶,我们都是这么溶的

我配制后的溶液是有点粘稠 这样可以吗?
5楼2012-10-09 22:08:48
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ilyzp

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 球球爱跳 at 2012-10-09 22:08:48
我配制后的溶液是有点粘稠 这样可以吗?...

可以的,我们的也这样,只要是澄清的就可以用
6楼2012-10-11 23:10:47
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ilyzp

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 球球爱跳 at 2012-10-09 21:03:27
谢谢你 我加热久会试试,不是很澄清是不是加入氯化钠的事啊...

同时加NACL应该是没影响的
7楼2012-10-11 23:12:25
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