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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 试剂盒提取与手工提取存在这么大的差异吗？
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caiyifan

金虫 (小有名气)

[求助] 试剂盒提取与手工提取存在这么大的差异吗？ 已有1人参与

我们老师说试剂盒提取DNA保存的时间很短，手工提取的保存时间很长，当然是在同等保存条件下，比如4℃
但，真是这样吗？DNA的降解除了温度外，还跟它们所处的体系有关系吧，但试剂盒提供的TE缓冲液和自配的TE不都一样吗？为什么试剂盒提取的DNA保存时间短呢？我不明白。
另外，降解的情况是不是还跟DNA的浓度相关？比如DNA的浓度高，降解慢，浓度低，降解快。我貌似看到过类似的说法。
请各位虫友帮帮忙。谢谢！！！！！！！！！！！！！！！！
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I can and I will
1楼 2012-12-13 09:57:08
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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caiyifan: 金币+3 2012-12-17 11:04:57
理论上不会的。老师这么说，可能是根据他之前的比较经验，而这个经验往往不具有统计学意义的。可能是某次试剂盒提取出来后来很快降解了吧；也有可能是不想让你们用kit，毕竟成本高，也不利于锻炼操作，把学生都养懒了。
好些牌子的kit提取的质量和保存时间都有保障 （如 Qiagen）。你如果想保存较长时间，就放到-20，甚至-80去，几个月都没问题的。
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2楼2012-12-13 10:36:07
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hraikeyan

金虫 (小有名气)
你们是提基因组吗？这个保存应该没有区别吧，两个之间 的区别在于用手提的过程中机械剪切力小，提出的基因组比较完整，片段大。用试剂盒提取的过程中，由于要过柱子，机械剪切力大，提取的基因组偏小，但是如果只是用于简单的PCR，试剂盒提取的问题不大，如果要勇于建库，还是用手提吧。
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nothing isimpossible
8楼2012-12-13 22:03:46
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普通回帖

zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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caiyifan: 金币+3 2012-12-17 11:01:22
如果都是标准操作的话，好像没明显差别。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2012-12-13 13:48:44
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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caiyifan: 金币+3 2012-12-17 11:01:29
没听说这个问题。一般为了省事就用盒子提。
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4楼2012-12-13 14:56:09
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zq347597638

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2012-12-13 23:12:40
caiyifan: 金币+3 2012-12-17 11:01:35
手提的一般得到的DNA浓度高  可以分装很多管  试剂盒得到的DNA一般浓度都很低  分装的少 DNA一般放在-20保存  你拿出来反复冻融当然不利于保存了
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5楼2012-12-13 15:35:23
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huoyongting

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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caiyifan: 金币+3 2012-12-17 11:01:39
真没听说这种说法，DNA对温度是很稳定的，平时降解应该是有DNA酶的原因
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6楼2012-12-13 17:28:00
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wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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caiyifan: 金币+3 2012-12-17 11:01:44
操作标准，没有DNA酶污染的情况下质粒还是很稳定的。长期存放最好在-20度，放上几个月问题并不大。
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7楼2012-12-13 21:52:14
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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caiyifan: 金币+3 2012-12-17 11:05:28
我觉得他们的试剂盒里面的成分是经过优化了的，所以要比自己所用的试剂组分要好，至于操作都是不会有太大问题，主要看试剂里面的优化组合。
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9楼2012-12-14 10:41:58
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
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caiyifan: 金币+3 2012-12-17 11:02:19
caiyifan: 金币+3 2012-12-17 11:05:38
个人经验还是试剂盒好点，差距明显
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让复杂的事情变简单，简单的事情更简单
10楼2012-12-14 11:23:40
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