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uuu555000

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[交流] 尖孢镰刀菌的RNA提取，哪家的RNA试剂盒效果好？求知道的虫友

尖孢镰刀菌的RNA提取，哪家的RNA试剂盒效果好？求知道的虫友
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1楼 2012-07-06 18:29:38
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sketch

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
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uuu555000: 金币+1 2012-07-07 20:42:04
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-09 13:45:03
提取以后要反转录吗？如果要做RT-PCR，则可用takara的高保真RT-PCR试剂盒，25次的900多元。提RNA，sigma的试剂蛮好，就是贵，takara的应该也还可以，可以向他们的技术顾问咨询，不过RT-PCR一定要买高保真的那款，即pcr聚合酶是primestar的那款，否则保真度不过，1000多个bp大小的片段都会出错。
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2楼2012-07-07 19:20:55
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uuu555000

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2楼: Originally posted by sketch at 2012-07-07 19:20:55
提取以后要反转录吗？如果要做RT-PCR，则可用takara的高保真RT-PCR试剂盒，25次的900多元。提RNA，sigma的试剂蛮好，就是贵，takara的应该也还可以，可以向他们的技术顾问咨询，不过RT-PCR一定要买高保真的那款，即 ...

做3race，OMega的真菌RNA提取试剂盒如何？
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3楼2012-07-07 20:41:31
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sketch

木虫 (正式写手)
★
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3楼: Originally posted by uuu555000 at 2012-07-07 20:41:31
做3race，OMega的真菌RNA提取试剂盒如何？...

你可以去咨询一下技术顾问，我想只要能提出来都是可以的，提出来，没有被rna酶降解，蛋白质污染不严重，应该就能P出来。
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4楼2012-07-08 11:07:44
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lw19850128

银虫 (小有名气)
★
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尖孢镰刀菌也是有菌丝体的吧？可以用植物RNA提取盒
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5楼2012-07-09 11:28:36
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tracy0529

新虫 (初入文坛)
★
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TRIZOL试剂也可以，但是尖孢镰刀菌的糖类物质太多，在沉淀前要用酚：氯仿异：戊醇（25：4:1）多抽提几次才能除干净，步骤太多RNA容易降解，还是在冰上操作比较好！
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6楼2012-08-13 11:13:48
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tiani_tan

金虫 (小有名气)
★
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生工有专门针对真菌的RNA抽提试剂盒，你可以问问他们的技术支持，会给你很好的建议的
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7楼2012-08-13 13:17:21
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yuan_0059

金虫 (初入文坛)
★
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我们也在提，不过总是失败，不知道问题出在哪里。我楼下一个实验室也在提，人家连DEPC水都不用，随便操作了下一上午就提出来了，真是佩服的五体投地，最近正在向她请教中...
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8楼2012-10-09 17:38:43
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uuu555000

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8楼: Originally posted by yuan_0059 at 2012-10-09 17:38:43
我们也在提，不过总是失败，不知道问题出在哪里。我楼下一个实验室也在提，人家连DEPC水都不用，随便操作了下一上午就提出来了，真是佩服的五体投地，最近正在向她请教中...

能否把方法给发一份？？
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9楼2012-10-10 07:15:02
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junminh

铜虫 (小有名气)
★
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提RNA的试剂盒提多的，比较经典的方法是TRIZOL，商品法的试剂盒我用过爱思进公司的总RNA纯化试剂盒提真菌，效果挺不错，做的是RT-/SORTHERN。
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10楼2012-10-10 08:03:36
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leaderjiangj

铜虫 (小有名气)
★
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各位大侠我也准备做呀
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11楼2012-10-10 08:56:31
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飘雪3889

木虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by yuan_0059 at 2012-10-09 17:38:43
我们也在提，不过总是失败，不知道问题出在哪里。我楼下一个实验室也在提，人家连DEPC水都不用，随便操作了下一上午就提出来了，真是佩服的五体投地，最近正在向她请教中...

能否把方法和经验也发给我一份，谢谢
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12楼2013-04-22 09:21:50
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yuan_0059

金虫 (初入文坛)
★
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12楼: Originally posted by 飘雪3889 at 2013-04-22 09:21:50
能否把方法和经验也发给我一份，谢谢...

不知道你现在解决没有，我现在用康为世纪的RNA提取试剂盒提 效果不错 RACE也能做出来。以前用TRIZOL提，突出一个快字！也能提出来，注意不要超过处理量。
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13楼2013-12-05 21:26:39
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