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uuu555000

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[交流] 尖孢镰刀菌的RNA提取,哪家的RNA试剂盒效果好?求知道的虫友

尖孢镰刀菌的RNA提取,哪家的RNA试剂盒效果好?求知道的虫友
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sketch

木虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
uuu555000: 金币+1 2012-07-07 20:42:04
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-09 13:45:03
提取以后要反转录吗?如果要做RT-PCR,则可用takara的高保真RT-PCR试剂盒,25次的900多元。提RNA,sigma的试剂蛮好,就是贵,takara的应该也还可以,可以向他们的技术顾问咨询,不过RT-PCR一定要买高保真的那款,即pcr聚合酶是primestar的那款,否则保真度不过,1000多个bp大小的片段都会出错。
2楼2012-07-07 19:20:55
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uuu555000

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引用回帖:
2楼: Originally posted by sketch at 2012-07-07 19:20:55
提取以后要反转录吗?如果要做RT-PCR,则可用takara的高保真RT-PCR试剂盒,25次的900多元。提RNA,sigma的试剂蛮好,就是贵,takara的应该也还可以,可以向他们的技术顾问咨询,不过RT-PCR一定要买高保真的那款,即 ...

做3race,OMega的真菌RNA提取试剂盒如何?
3楼2012-07-07 20:41:31
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sketch

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by uuu555000 at 2012-07-07 20:41:31
做3race,OMega的真菌RNA提取试剂盒如何?...

你可以去咨询一下技术顾问,我想只要能提出来都是可以的,提出来,没有被rna酶降解,蛋白质污染不严重,应该就能P出来。
4楼2012-07-08 11:07:44
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lw19850128

银虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
尖孢镰刀菌也是有菌丝体的吧?可以用植物RNA提取盒
5楼2012-07-09 11:28:36
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tracy0529

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
TRIZOL试剂也可以,但是尖孢镰刀菌的糖类物质太多,在沉淀前要用酚:氯仿异:戊醇(25:4:1)多抽提几次才能除干净,步骤太多RNA容易降解,还是在冰上操作比较好!
6楼2012-08-13 11:13:48
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tiani_tan

金虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
生工有专门针对真菌的RNA抽提试剂盒,你可以问问他们的技术支持,会给你很好的建议的
7楼2012-08-13 13:17:21
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yuan_0059

金虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们也在提,不过总是失败,不知道问题出在哪里。我楼下一个实验室也在提,人家连DEPC水都不用,随便操作了下一上午就提出来了,真是佩服的五体投地,最近正在向她请教中...
8楼2012-10-09 17:38:43
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uuu555000

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引用回帖:
8楼: Originally posted by yuan_0059 at 2012-10-09 17:38:43
我们也在提,不过总是失败,不知道问题出在哪里。我楼下一个实验室也在提,人家连DEPC水都不用,随便操作了下一上午就提出来了,真是佩服的五体投地,最近正在向她请教中...

能否把方法给发一份??
9楼2012-10-10 07:15:02
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junminh

铜虫 (小有名气)



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提RNA的试剂盒提多的,比较经典的方法是TRIZOL,商品法的试剂盒我用过爱思进公司的总RNA纯化试剂盒提真菌,效果挺不错,做的是RT-/SORTHERN。
10楼2012-10-10 08:03:36
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leaderjiangj

铜虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
各位大侠我也准备做呀
11楼2012-10-10 08:56:31
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飘雪3889

木虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by yuan_0059 at 2012-10-09 17:38:43
我们也在提,不过总是失败,不知道问题出在哪里。我楼下一个实验室也在提,人家连DEPC水都不用,随便操作了下一上午就提出来了,真是佩服的五体投地,最近正在向她请教中...

能否把方法和经验也发给我一份,谢谢
12楼2013-04-22 09:21:50
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yuan_0059

金虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by 飘雪3889 at 2013-04-22 09:21:50
能否把方法和经验也发给我一份,谢谢...

不知道你现在解决没有,我现在用康为世纪的RNA提取试剂盒提 效果不错 RACE也能做出来。以前用TRIZOL提,突出一个快字!也能提出来,注意不要超过处理量。
13楼2013-12-05 21:26:39
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