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试剂盒提取与手工提取存在这么大的差异吗?
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caiyifan
金虫
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试剂盒提取与手工提取存在这么大的差异吗?
已有1人参与
我们老师说试剂盒提取DNA保存的时间很短,手工提取的保存时间很长,当然是在同等保存条件下,比如4℃
但,真是这样吗?DNA的降解除了温度外,还跟它们所处的体系有关系吧,但试剂盒提供的TE缓冲液和自配的TE不都一样吗?为什么试剂盒提取的DNA保存时间短呢?我不明白。
另外,降解的情况是不是还跟DNA的浓度相关?比如DNA的浓度高,降解慢,浓度低,降解快。我貌似看到过类似的说法。
请各位虫友帮帮忙。谢谢!!!!!!!!!!!!!!!!
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I can and I will
1楼
2012-12-13 09:57:08
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hraikeyan
金虫
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专业: 微生物生理与生物化学
你们是提基因组吗?这个保存应该没有区别吧,两个之间 的区别在于用手提的过程中机械剪切力小,提出的基因组比较完整,片段大。用试剂盒提取的过程中,由于要过柱子,机械剪切力大,提取的基因组偏小,但是如果只是用于简单的PCR,试剂盒提取的问题不大,如果要勇于建库,还是用手提吧。
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nothing isimpossible
8楼
2012-12-13 22:03:46
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gaoyang636
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caiyifan: 金币+3
2012-12-17 11:04:57
理论上不会的。老师这么说,可能是根据他之前的比较经验,而这个经验往往不具有统计学意义的。可能是某次试剂盒提取出来后来很快降解了吧;也有可能是不想让你们用kit,毕竟成本高,也不利于锻炼操作,把学生都养懒了。
好些牌子的kit提取的质量和保存时间都有保障 (如 Qiagen)。你如果想保存较长时间,就放到-20,甚至-80去,几个月都没问题的。
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2楼
2012-12-13 10:36:07
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zhaodahe
木虫
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专业: 微生物遗传学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
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caiyifan: 金币+3
2012-12-17 11:01:22
如果都是标准操作的话,好像没明显差别。
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼
2012-12-13 13:48:44
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cicelyzh
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专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
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caiyifan: 金币+3
2012-12-17 11:01:29
没听说这个问题。一般为了省事就用盒子提。
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4楼
2012-12-13 14:56:09
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