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piggyflym

金虫 (正式写手)

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[求助] 如何定位外源片段插入位点已有1人参与

利用含有双元表达载体的农杆菌把外源基因随机插入真菌宿主的基因组中构建随机突变体库，怎么样去定位这个外源片段插入的位置

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1楼 2015-06-11 14:09:31

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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
piggyflym: 金币+10, ★有帮助 2015-06-30 08:55:21

根据载体左右T边界序列设计特异引物，做染色体步移TAIL-PCR。得到扩增条带后，回收测序，用测序结果对真菌宿主基因组进行blast比对，以此判断插入位置。

赞一下(1人)

2楼2015-06-11 21:33:27

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