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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 小麦苗期RNA提取求助
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〇秋基地

金虫 (著名写手)

[求助] 小麦苗期RNA提取求助 已有1人参与

第一次学习提取小麦苗期RNA，A图是第一次提的，降解了，B图是今天提的，我不知道这是失败还是成功了，请大家帮忙分析一下，顺便告诉我在用试剂盒（我用的是OMEGA-BIO TEK）提取RNA的时候应该注意什么，谢谢大家了。拜托拜托。

小麦苗期RNA提取求助
RNA试_副本.jpg


小麦苗期RNA提取求助-1
rna试-6-5-2_副本.jpg
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1楼 2015-06-05 13:32:09
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
〇秋基地: 金币+19, ★★★很有帮助, 十分感谢！唯一的回复，十分感动。 2015-06-05 16:43:08
第一次提的降解。第二次提的，有几个问题？marker多大？28S与18S条带的比例应该是2：1.另外，可以测一下260：280，应该在2.0左右。
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2楼2015-06-05 13:48:10
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〇秋基地

金虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-06-05 13:48:10
第一次提的降解。第二次提的，有几个问题？marker多大？28S与18S条带的比例应该是2：1.另外，可以测一下260：280，应该在2.0左右。

我不晓得B图是成功还是失败，就觉得判定很模糊。Marker是D2000的。谢谢你了。
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3楼2015-06-05 13:56:02
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晞朔

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 〇秋基地 at 2015-06-05 13:56:02
我不晓得B图是成功还是失败，就觉得判定很模糊。Marker是D2000的。谢谢你了。...

测一下OD值吧
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4楼2015-06-05 15:09:38
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〇秋基地

金虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-06-05 15:09:38
测一下OD值吧...

测了。
1号OD260/280=2.15，OD230/260=2.34,浓度1198；
2号OD260/280=2.13，OD230/260=2.13,浓度633.9；
3号OD260/280=2.16，OD230/260=2.18,浓度963.
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5楼2015-06-05 15:22:37
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晞朔

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 〇秋基地 at 2015-06-05 15:22:37
测了。
1号OD260/280=2.15，OD230/260=2.34,浓度1198；
2号OD260/280=2.13，OD230/260=2.13,浓度633.9；
3号OD260/280=2.16，OD230/260=2.18,浓度963....

完全可以。很好的结果
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6楼2015-06-05 15:37:20
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〇秋基地

金虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-06-05 15:37:20
完全可以。很好的结果...

最后一个问题，请问提取的RNA质量好坏是以跑胶结果还是测的OD值为标准？
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7楼2015-06-05 15:55:07
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晞朔

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 〇秋基地 at 2015-06-05 15:55:07
最后一个问题，请问提取的RNA质量好坏是以跑胶结果还是测的OD值为标准？...

都可以，一般会要求这两个都比较好。电泳结果可以更直观。但是数字化对你后期的试验有直接帮助。
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8楼2015-06-05 16:05:52
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〇秋基地

金虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-06-05 16:05:52
都可以，一般会要求这两个都比较好。电泳结果可以更直观。但是数字化对你后期的试验有直接帮助。...

十分感谢！！！
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9楼2015-06-05 16:39:35
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书生的哥哥啊

铜虫 (初入文坛)
2图靠近孔的应该是18S、28S的条带，还有Marker不是用的RNA Marker话，没什么参考价值
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10楼2015-07-10 22:04:38
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