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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于蛋白分子筛层析的问题，求指导
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EDTA不寂寞

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于蛋白分子筛层析的问题，求指导 已有1人参与

最近在做sod的纯化，采用了葡聚糖凝胶g75做分子筛层析，蛋白没有分开，现在考虑问题出在前一步没有出去核酸等杂质，没有进行这一步分离是不是会对蛋白的分离造成很大的影响？然后在过柱子的时候是不是应该选用磷酸缓冲液做洗脱而吧应该用水？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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失败，总在成功之前发生，成功路上，放弃就是失败。
1楼 2015-06-05 10:16:16
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永远的笑莲

铁虫 (初入文坛)
对于蛋白的层析纯化，首先就应该分离剔除掉材料中所蕴含的核酸，细胞碎片等杂质成分。，即进行样品的预处理。
另外，样品过柱子的时候，怎么可能会用水进行洗脱的呢。就应该用缓冲液的，全部的过程就都不应该用水。
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2楼2015-06-11 12:01:43
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calorimetry

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

过柱一般都用缓冲溶液，比如PB缓冲液，杂质一般过柱都可以去掉，不溶性的颗粒实现离心沉淀去除。
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3楼2015-06-11 12:44:28
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