24小时热门版块排行榜    

查看: 2170  |  回复: 4

野草妮妮

金虫 (小有名气)

[求助] 肝脏匀浆提蛋白遇到问题,求助!! 已有2人参与

由于实验设计,模型会造成肝脏严重充血,那么做western提取肝脏蛋白之前肝脏需要做什么预处理吗?

我试过取适量肝脏直接匀浆,上清液颜色较红,不知道混有血清的话对目的蛋白检测有没有影响?

可以将组织在生理盐水中剪成小块,再把生理盐水换成裂解液再匀浆吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kueradi

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流, 2014-04-18 08:59:41
野草妮妮: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-05-07 21:38:55
在生理盐水里粗略的洗洗,换液,然后在生理盐水里剪成块洗,块不要太小。最后把组织块取出,加入裂解液就可以了。各组之间差不多就可以了。
2楼2014-04-17 20:06:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

野草妮妮

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kueradi at 2014-04-17 20:06:27
在生理盐水里粗略的洗洗,换液,然后在生理盐水里剪成块洗,块不要太小。最后把组织块取出,加入裂解液就可以了。各组之间差不多就可以了。

非常感谢!这样对蛋白的量有影响吗?
3楼2014-04-17 20:49:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李小冬

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
野草妮妮(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-04-18 12:34:38
需要看你是什么蛋白,可以先眼球放血,在放血过程中,用手指轻抚小鼠胸腹部,然后取肝脏样本。有必要,我一般用PBS洗……两种结果 对western结果影响不大,我做的目的蛋白是转录因子。
哎呀呀
4楼2014-04-18 09:29:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kueradi

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 野草妮妮 at 2014-04-17 20:49:50
非常感谢!这样对蛋白的量有影响吗?...

还好,一般课题做完了肝脏都是用不完的,米粒大小的肝脏就够做蛋白western了,不放心你可以多切一点,但不要太多,如果实验周期长,用不完的蛋白到文章补实验的时候可能会降解,多了是浪费。
5楼2014-04-18 11:04:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 学员NaH8My 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 285求调剂 +5 ytter 2026-03-22 5/250 2026-03-22 11:13 by 杨杨杨紫
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 4/200 2026-03-22 11:04 by 搏击518
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +4 NIFFFfff 2026-03-20 4/200 2026-03-22 09:49 by 2026paper
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +5 张vvvv 2026-03-15 7/350 2026-03-21 19:23 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +5 十三加油 2026-03-21 5/250 2026-03-21 18:48 by 学员8dgXkO
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 机械专硕299求调剂至材料 +3 kkcoco25 2026-03-16 4/200 2026-03-21 03:52 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +10 yy要上岸呀 2026-03-17 10/500 2026-03-21 03:14 by JourneyLucky
[考研] 303求调剂 +5 睿08 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:11 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南昌大学,327分,材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
[考研] 288求调剂 +16 于海海海海 2026-03-19 16/800 2026-03-20 22:28 by JourneyLucky
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[论文投稿] 申请回稿延期一个月,编辑同意了。但系统上的时间没变,给编辑又写邮件了,没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 生物学调剂招人!!! +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 293求调剂 +11 zjl的号 2026-03-16 16/800 2026-03-18 08:10 by zhukairuo
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
信息提示
请填处理意见