24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 4648  |  回复: 20
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

风雪云

木虫 (小有名气)

[交流] 质粒转入BL21菌中发现菌生长很慢这是什么原因 已有12人参与

最近做基因重组,目的片段插入到PET15b中,转入DH5α长出单克隆并测序成功,然后提取的质粒再转入到BL21中进行培养,有时候小培正常,但是扩大培养的时候生长很缓慢,还有甚者挑的单克隆小培有时候生长也很缓慢,从来没有遇到过这么奇葩的情况,这是什么问题啊?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

大肠杆菌工程菌发酵

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风雪云

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by luwei13566 at 2015-06-02 00:50:54
很慢是个什么概念?能不能说清楚点不要让人去猜。扩培加了多少菌?扩培了多长时间?OD值到多少?

扩大培养有时候就长不起来,有时候长起来竟然用了8个小时。接菌的量而且比正常接菌多了一倍。
7楼2015-06-02 21:30:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

zhang6871

银虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-02 23:14:20
BL21本来就要比常用的克隆菌株长的慢,但不会很多。
如果非常慢可能是培养基出问题了。或者就是表达的蛋白可能有毒性。
过于功利,浮躁,布满灰尘的心都是创新的杀手!多记,心静,多动手,贴近大自然!
2楼2015-06-01 18:18:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风雪云

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhang6871 at 2015-06-01 18:18:03
BL21本来就要比常用的克隆菌株长的慢,但不会很多。
如果非常慢可能是培养基出问题了。或者就是表达的蛋白可能有毒性。

培养基应该没事,因为培养别的菌还挺正常的,就是培养这个就不行老是不能扩大培养。还有我以前做过比我这个目的片段截短的还能表达出来,到这个反倒不行了,真的很郁闷。
3楼2015-06-01 19:43:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

my_father

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可能是质粒低拷贝,抗性不强吧。。。
4楼2015-06-01 23:29:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿中科大材料与化工,353分还有调剂学校吗 +9 否极泰来2026 2026-04-15 11/550 2026-04-17 11:08 by liuzhexuan12
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀,最好在一个月之内的,研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 5/250 2026-04-17 10:02 by bobvan
[考研] 材料相关专业344求调剂双非工科学校或课题组 +23 hualkop 2026-04-12 25/1250 2026-04-16 22:12 by SUSE_CL
[考博] 申博自荐 +3 Linxia林夏 2026-04-13 3/150 2026-04-16 12:55 by 墨荷之露
[考研] 求调剂推荐 +8 小聂爱学习 2026-04-14 8/400 2026-04-16 07:22 by 学员JpLReM
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +4 白云123456789 2026-04-13 4/200 2026-04-16 00:18 by 粉沁若尘
[考研] 一志愿A区211,22408 321求调剂 +6 随心所欲☆ 2026-04-15 7/350 2026-04-15 21:45 by lbsjt
[考研] 药学305求调剂 +7 玛卡巴卡boom 2026-04-11 7/350 2026-04-15 13:21 by 西北望—风沙
[考研] 211本科材料化工求调剂 +19 YHLAH 2026-04-11 23/1150 2026-04-14 22:25 by fenglj492
[考研] 药学305求调剂 +10 玛卡巴卡boom 2026-04-10 10/500 2026-04-14 15:55 by zs92450
[考研] 366求调剂 +11 不知名的小卅 2026-04-11 11/550 2026-04-14 15:50 by zs92450
[教师之家] 转长聘了 +7 简单化xn 2026-04-13 7/350 2026-04-14 14:50 by xindong
[考研] 求调剂 +12 何气正 2026-04-13 13/650 2026-04-14 14:47 by zs92450
[考研] 305求调剂 +8 玛卡巴卡boom 2026-04-11 8/400 2026-04-14 09:04 by pengliang8036
[考研] 考研求调剂 +12 子木呐 2026-04-12 13/650 2026-04-14 01:19 by 王珺璞
[考研] 302求调剂 +10 易!? 2026-04-13 10/500 2026-04-13 19:04 by lbsjt
[考研] 359求调剂 +5 胃痉挛累了 2026-04-11 5/250 2026-04-11 19:55 by lbsjt
[考研] 求调剂,一志愿大连理工大学354分 +5 雨声余生 2026-04-11 6/300 2026-04-11 16:12 by 雨声余生
[考研] 0859,337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 11:34 by caotw2020
[考研] 0854调剂 +5 音像店听花鼓戏 2026-04-10 5/250 2026-04-11 10:49 by qingpingzhu
信息提示
请填处理意见