应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒转入BL21菌中发现菌生长很慢这是什么原因
211/3返回列表123下一页
查看: 4535  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

风雪云

木虫 (小有名气)

[交流] 质粒转入BL21菌中发现菌生长很慢这是什么原因 已有12人参与

最近做基因重组，目的片段插入到PET15b中，转入DH5α长出单克隆并测序成功，然后提取的质粒再转入到BL21中进行培养，有时候小培正常，但是扩大培养的时候生长很缓慢，还有甚者挑的单克隆小培有时候生长也很缓慢，从来没有遇到过这么奇葩的情况，这是什么问题啊？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

大肠杆菌工程菌发酵

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-06-01 16:48:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zhang6871

银虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-02 23:14:20
BL21本来就要比常用的克隆菌株长的慢，但不会很多。
如果非常慢可能是培养基出问题了。或者就是表达的蛋白可能有毒性。
赞一下(1人) 回复此楼
过于功利，浮躁，布满灰尘的心都是创新的杀手!多记，心静，多动手，贴近大自然!
2楼2015-06-01 18:18:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

风雪云

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhang6871 at 2015-06-01 18:18:03
BL21本来就要比常用的克隆菌株长的慢，但不会很多。
如果非常慢可能是培养基出问题了。或者就是表达的蛋白可能有毒性。

培养基应该没事，因为培养别的菌还挺正常的，就是培养这个就不行老是不能扩大培养。还有我以前做过比我这个目的片段截短的还能表达出来，到这个反倒不行了，真的很郁闷。
赞一下 回复此楼
3楼2015-06-01 19:43:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

my_father

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能是质粒低拷贝，抗性不强吧。。。
赞一下 回复此楼
4楼2015-06-01 23:29:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风雪云

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by my_father at 2015-06-01 23:29:31
可能是质粒低拷贝，抗性不强吧。。。

不是这个问题

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
5楼2015-06-02 00:15:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luwei13566

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
很慢是个什么概念？能不能说清楚点不要让人去猜。扩培加了多少菌？扩培了多长时间？OD值到多少？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
大家相互帮助哈
6楼2015-06-02 00:50:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风雪云

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by luwei13566 at 2015-06-02 00:50:54
很慢是个什么概念？能不能说清楚点不要让人去猜。扩培加了多少菌？扩培了多长时间？OD值到多少？

扩大培养有时候就长不起来，有时候长起来竟然用了8个小时。接菌的量而且比正常接菌多了一倍。
赞一下 回复此楼
7楼2015-06-02 21:30:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luwei13566

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 风雪云 at 2015-06-02 21:30:34
扩大培养有时候就长不起来，有时候长起来竟然用了8个小时。接菌的量而且比正常接菌多了一倍。...

扩培的时候你的培养基里加氨苄了没？
赞一下 回复此楼
大家相互帮助哈
8楼2015-06-02 22:21:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuebaobingyu

金虫 (正式写手)
蛋白毒性

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
9楼2015-06-02 22:43:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuebaobingyu

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by xuebaobingyu at 2015-06-02 22:43:32
蛋白毒性

诱导后细菌都死了  越来越清

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
10楼2015-06-02 22:44:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 风雪云 的主题更新
211/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856材料专业298分有科研经历 硕士研究生调剂自荐信 +6 zyf上岸 2026-03-01 6/300 2026-03-01 12:43 by liqiongjy
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考研] 272求调剂 +5 材紫有化 2026-02-28 5/250 2026-03-01 11:51 by gaoxiaoniuma
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +3 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 6/300 2026-03-01 11:50 by gaoxiaoniuma
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 材料类求调剂 +8 wana_kiko 2026-02-28 8/400 2026-03-01 11:44 by 王伟要上岸啊
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[考研] 291分工科求调剂 +7 science饿饿 2026-03-01 8/400 2026-03-01 10:43 by sunny81
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 285求调剂 +6 满头大汗的学生 2026-02-28 6/300 2026-03-01 06:29 by Trying]
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +4 弗格个 2026-02-28 6/300 2026-02-28 22:00 by wang_dand
[考研] 298求调剂 +8 人间唯你是清欢 2026-02-28 11/550 2026-02-28 20:26 by L135790
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[考研] 0856调剂 +3 刘梦微 2026-02-28 3/150 2026-02-28 13:22 by houyaoxu
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭