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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 很多次PCR都是刚稀释后的DNA能够P出来，这是为啥？
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yangyang1991

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 很多次PCR都是刚稀释后的DNA能够P出来，这是为啥？ 已有6人参与

Rt
用PCR检测转基因，用CTAB法提的DNA，稀释后（浓度一般100左右ng），刚稀释后P能够出条带，再做都是放4度冰箱，就怎么都不出来了～～挺苦恼的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2015-05-19 17:32:44
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
yangyang1991: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-05-23 10:46:51
引用回帖:
5楼: Originally posted by yangyang1991 at 2015-05-20 17:18:48
好吧，那反复冻融应该也不好吧
...

何必要反复冻融？稀释后直接分装就可以了，取一管用一管，用完直接扔掉不需要再冻起来。。。
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大家相互帮助哈
9楼2015-05-21 14:07:34
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普通回帖

晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-20 10:14:16
DNA放在４度还是会降解的。最好放－２０
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2楼2015-05-19 18:23:09
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yangyang1991

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-05-19 18:23:09
DNA放在４度还是会降解的。最好放－２０

就两天

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-05-19 19:27:58
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luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-20 10:14:31
放在4度是完全不可靠的，特别是上层冷藏柜里东西很乱的情况下
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大家相互帮助哈
4楼2015-05-19 19:56:54
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yangyang1991

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by luwei13566 at 2015-05-19 19:56:54
放在4度是完全不可靠的，特别是上层冷藏柜里东西很乱的情况下

好吧，那反复冻融应该也不好吧

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2015-05-20 17:18:48
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jiayun

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yangyang1991: 金币+1, ★★★很有帮助 2015-05-23 10:47:08
建议稀释完后分装，冷冻，用时拿出一管，减少反复冻融
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6楼2015-05-21 10:34:24
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yzc937168

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
试着用te溶DNA，防止降解

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吼吼吼～
7楼2015-05-21 11:09:16
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lihu5

木虫 (著名写手)
应该放负二十，不然很快就会讲解

[ 发自小木虫客户端 ]
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我们都曾年轻过~
8楼2015-05-21 11:51:09
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feng890327

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yangyang1991: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-05-23 10:47:28
建议可以把样品分成若干份置于-20度保存，用的时候拿一份出来即可，4度也很容易降解
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10楼2015-05-22 09:11:11
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