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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 基因表达实验Real-time PCR GAPDH内参跑不出来是怎么回事啊？
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shuangyang7218

银虫 (小有名气)

[求助] 基因表达实验Real-time PCR GAPDH内参跑不出来是怎么回事啊？ 已有1人参与

刚学的基因表达实验，上次还能跑出来，这次Real-time PCR   只有GAPDH内参跑不出来，但引物都能跑出来是怎么回事啊？求大神帮忙a!都快疯了@！
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心若无尘，一花一世界，一鸟一天堂！
1楼 2015-03-06 23:47:06
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泰州木虫

金虫 (小有名气)
你确定内参基因的引物没有问题？用普通PCR检测过么？
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just do it!
2楼2015-03-07 18:03:01
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shuangyang7218

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 泰州木虫 at 2015-03-07 18:03:01
你确定内参基因的引物没有问题？用普通PCR检测过么？

没测呢，用普通PCR怎么测？我现向别人要actin的引物测一下试试呢
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心若无尘，一花一世界，一鸟一天堂！
3楼2015-03-09 12:02:49
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泰州木虫

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by shuangyang7218 at 2015-03-09 12:02:49
没测呢，用普通PCR怎么测？我现向别人要actin的引物测一下试试呢...

同样的模板，一起做的PCR，就内参没出来结果，应该就是引物的问题了。
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just do it!
4楼2015-03-09 17:22:55
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gnot_nail

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引物问题吧，内参引物退火温度和你目的基因引物的退火温度是不是差太多了？不行就重新找内参引物
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5楼2015-03-09 17:55:17
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