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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » DNA提取 电泳显示有很多很小片段
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夏冰莲

新虫 (小有名气)

[求助] DNA提取 电泳显示有很多很小片段 已有5人参与

提取的真菌DNA ,电泳条带最前面很亮，怎么回事，影响PCR吗？

DNA提取   电泳显示有很多很小片段
20150516_看图王.jpg
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1楼 2015-05-16 17:00:05
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崔兵杰

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by erland21411 at 2015-05-23 22:36:40
你做的胶是百分之多少的啊？前面很亮一般就是RNA了，点样孔是真个都亮还是亮在电泳方向的一边啊？如果是后者那可能是DNA，而且你跑DNA的话可以考虑换一些大分力量的M。...

我用的１％的胶，跑四十分钟的话整个进样孔都是亮的，然后跑了个一个半小时的话进样孔的好像刚要出孔，后来换了ｍａｒｋｅｒ，λＤＮＡ／ｈｉｎｄ　ＩＩＩ，结果跑了两个小时后好像还不如一个半小时的效果好，然后刚刚又跑了个１００ｍｉｎ的，还是进样孔亮，不过有一个样品走到胶的一半位置了，不过像是拖带的样子，很宽的那种条带，不是ｍａｒｋｅｒ那种条带的样子，会不会我一直就没把ＤＮＡ提出来？还是说，提出来后时间太久，降解了？我在－２０℃保存的，不过经常拿出来用。再就是用ＥＢ染色的话，如果样品有蛋白质，蛋白质也会发亮么，我们老师说蛋白质不会被ＥＢ染色，但是我看这里好多人说进样孔亮是蛋白质发亮。
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8楼2015-05-24 10:10:21
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小蚂蚁虫

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
夏冰莲(晞朔代发): 金币+1 2015-05-17 13:30:46
可能是蛋白 不影响PCR 但是你下面怎么那么亮
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2楼2015-05-16 18:49:37
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议用酚多抽提一次
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4楼2015-05-17 13:10:47
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我恨果冻

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

下面特别亮的光团吗？是不是没有进行RNA消化？建议加RNA酶消化一个小时。胶孔里的东西可能是一些杂质，大概抽提的时候不小心抽到蛋白了。
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5楼2015-05-19 18:30:13
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