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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » DNA电泳图为什么拖尾现象的原因是什么？
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angelababy91

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA电泳图为什么拖尾现象的原因是什么？已有3人参与

提取真菌DNA的浓度稀释到100ng/ul，其纯度即OD260/280为1.98，跑DNA的多态性PCR之后用2.5%的琼脂糖凝胶电泳，染料为Goldview，电泳的电压为80V，50分钟。在紫外成像仪上拍照观察，可是条带不太清楚，而且拖尾现象很严重，请大师们帮我看一下这幅电泳图，为什么条带不清楚而且拖尾现象这么严重呢？

DNA电泳图为什么拖尾现象的原因是什么？
PCR.jpg
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1楼2015-05-12 20:00:09
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shucanwei

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
要优化一下程序，把模板浓度稀释一下，不要浓度太大， 稀释一个梯度来做，10倍，20倍，50倍，100倍等。
你把pcr体系发出来看看，估计酶也加多了。
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唯以一人治天下，不以天下奉一人。
5楼2015-05-15 13:20:58
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feng890327

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by daniel1112 at 2015-05-12 23:51:43
优化一下体系，提高退火温度再扩。

有可能是酶加多了
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3楼2015-05-13 10:07:51
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erland21411

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你这个DNA样品里面确定没有蛋白污染吗？同意二楼说的提高退火温度。同时，你的Mark也有模糊的背景，考虑一下琼脂糖胶的问题吧……
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4楼2015-05-13 11:04:35
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1520113

新虫 (初入文坛)
请问你用的什么琼脂糖凝胶电泳仪呢？谢谢

发自小木虫Android客户端
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6楼2016-09-10 17:24:42
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