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angelababy91

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA电泳图为什么拖尾现象的原因是什么? 已有3人参与

提取真菌DNA的浓度稀释到100ng/ul,其纯度即OD260/280为1.98,跑DNA的多态性PCR之后用2.5%的琼脂糖凝胶电泳,染料为Goldview,电泳的电压为80V,50分钟。在紫外成像仪上拍照观察,可是条带不太清楚,而且拖尾现象很严重,请大师们帮我看一下这幅电泳图,为什么条带不清楚而且拖尾现象这么严重呢?

DNA电泳图为什么拖尾现象的原因是什么?
PCR.jpg
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feng890327

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by daniel1112 at 2015-05-12 23:51:43
优化一下体系,提高退火温度再扩。

有可能是酶加多了
3楼2015-05-13 10:07:51
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查看全部 6 个回答

erland21411

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这个DNA样品里面确定没有蛋白污染吗?同意二楼说的提高退火温度。同时,你的Mark也有模糊的背景,考虑一下琼脂糖胶的问题吧……
4楼2015-05-13 11:04:35
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shucanwei

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
要优化一下程序,把模板浓度稀释一下,不要浓度太大, 稀释一个梯度来做,10倍,20倍,50倍,100倍等。
你把pcr体系发出来看看,估计酶也加多了。
唯以一人治天下,不以天下奉一人。
5楼2015-05-15 13:20:58
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1520113

新虫 (初入文坛)

请问你用的什么琼脂糖凝胶电泳仪呢?谢谢

发自小木虫Android客户端
6楼2016-09-10 17:24:42
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