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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 融合蛋白表达问题。
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站着别动君

新虫 (小有名气)

[交流] 融合蛋白表达问题。

几个蛋白融合表达，转染真核细胞，western有的蛋白能检测到，有的蛋白检测不到？ORF没有问题。
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1楼 2015-05-07 16:50:36
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站着别动君

新虫 (小有名气)
2楼2015-05-08 16:07:41
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站着别动君

新虫 (小有名气)
3楼2015-05-08 16:07:52
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这问题问的。。。好歹说的详细点啊。。。资料这么少，鬼才知道为什么没有咧
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早上一副睡不醒的样子，下午一副没睡醒的样子，晚上一副打了鸡血的样子！
4楼2015-05-12 14:31:21
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zmxwfd

新虫 (初入文坛)
你想问什么。。。。
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5楼2015-05-15 20:46:22
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mazhenggen

铁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
导致蛋白不表达的因素很多：1、确定基因插入到宿主细胞基因组中，位置是否合适，拷贝数有多少，可以通过PCR和Southern blot检测；2、检测细胞中目的蛋白mRNA水平，验证DNA的转录是否有问题。3、如果mRNA正常，那么有可能是融合蛋白结构不稳定导致降解，降解的因素也有很多，像蛋白结构不稳定容易被细胞中蛋白水解酶降解，还有融合蛋白对细胞的代谢有影响，抑制蛋白表达，也有可能蛋白的mRNA不稳定，半衰期短容易降解。
楼主可以逐个排除蛋白不表达的因素，找到原因问题就可以好解决了，希望回复有用。
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我喜欢所以我做
6楼2015-05-17 10:26:40
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肖大爷1314

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
LZ做哺乳动物表达蛋白，也得给个具体点的例子吧，比如什么蛋白，感觉楼主问的怪怪的~祝好！
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追求真理的道路上永远不会孤独
7楼2015-12-29 11:14:37
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晴空女孩

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也做这个，表达不出来。大半年了

发自小木虫Android客户端
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8楼2019-12-16 10:09:29
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